精品文档---下载后可任意编辑RP-HPLC 测定大鼠体内 D、L-神经兴奋型氨基酸的含量的开题报告一、讨论背景和意义神经兴奋型氨基酸是中枢神经系统中最主要的兴奋性神经递质,其中 D、L-苯丙氨酸、D、L-天门冬氨酸、D、L-谷氨酸等是其中最重要的代表,常被用于评价神经递质系统的功能异常。目前已有许多讨论表明,D、L-苯丙氨酸、D、L-天门冬氨酸、D、L-谷氨酸的含量与中枢神经系统的各种疾病密切相关,因此对于这些氨基酸的测定具有非常重要的临床意义。高效液相色谱法(RP-HPLC)是一种能够高效、精确测定各种化合物的分离技术,尤其适用于生物化学领域中极为复杂的样品分离和分析。本讨论将采纳 RP-HPLC 技术,测定大鼠体内 D、L-苯丙氨酸、D、L-天门冬氨酸、D、L-谷氨酸的含量,对于探究其与中枢神经系统疾病的关系,具有重要的参考价值。二、讨论目的1. 建立一种快速、灵敏、准确的 RP-HPLC 测定大鼠体内 D、L-神经兴奋型氨基酸的含量方法;2. 探究大鼠体内 D、L-苯丙氨酸、D、L-天门冬氨酸、D、L-谷氨酸的含量变化规律;3. 分析 D、L-苯丙氨酸、D、L-天门冬氨酸、D、L-谷氨酸的含量与中枢神经系统疾病的关系。三、讨论方法及步骤1.实验动物本实验选取体重在 200-250g 的成年雄性野生型 SD 大鼠,禁食 12小时后,将其分为实验组和对比组,各 10 只。2.处理方法实验组采纳正常食物与给药处理的方法,对比组采纳正常食物加生理盐水处理。处理时间为 14 天。3.样品制备精品文档---下载后可任意编辑将大鼠血液采样,离心后取血浆,使用 RP-HPLC 法分离这些神经递质。4.RP-HPLC 测定使用 RP-HPLC 仪器,离子对色谱柱分离,以 TBA(四丁基氨长水杨基酸)作为反相剂,梯度洗脱,检测波长为杂质峰的 254nm,以还原前体胺酸作为标志物,建立一个准确、可靠的 RP-HPLC 方法,测量大鼠体内神经递质的含量。四、预期结果1.建立一种重复性好、准确度高、检测限低 RP-HPLC 测定法,可准确地测量大鼠体内 D、L-苯丙氨酸、D、L-天门冬氨酸、D、L-谷氨酸的含量;2.大鼠体内 D、L-苯丙氨酸、D、L-天门冬氨酸、D、L-谷氨酸的含量会因处理方法的改变而有所不同;3.分析 D、L-苯丙氨酸、D、L-天门冬氨酸、D、L-谷氨酸和神经递质系统疾病之间的关系,探究其相关性。