精品文档---下载后可任意编辑SM22α 敲除小鼠血管转录组学分析及差显基因的功能验证的开题报告第一部分：讨论背景和意义SM22α 是一种特异的血管平滑肌细胞标志物，其编码基因 SM22α 在血管平滑肌细胞中高表达。SM22α 的发现对于讨论血管平滑肌细胞的分化、功能以及生长调控等方面具有重要的意义。SM22α 基因敲除小鼠是一种常用的实验动物模型，其可以用来讨论 SM22α 的生物学功能。本讨论旨在通过 SM22α 基因敲除小鼠血管转录组学分析，探究 SM22α 基因敲除对血管平滑肌细胞的整体基因表达水平和调控机制的影响，并进一步验证 SM22α 基因敲除对差显基因的功能影响。第二部分：讨论内容和方法1.动物模型的制备本讨论使用 SM22α 基因敲除小鼠作为讨论模型，并以野生型小鼠为对比组。实验动物经过建立后，采纳 RT-PCR 和 Western blotting 验证 SM22α 基因的敲除效果。2.转录组学分析将采集到的小鼠主动脉和肺动脉组织分别进行 RNA 提取，将 RNA库建立后利用高通量测序技术进行转录组学分析，获得基因表达水平的大量信息并进一步讨论 SM22α 在小鼠血管平滑肌细胞中的调控机制。借助生物信息学方法，推断差异表达基因，进行 Gene Ontology 分析和通路分析。3.差显基因的功能验证本讨论筛选出与 SM22α 敲除相关的差异表达基因，使用 siRNA 或 Crispr-Cas9 技术沉默或敲除目标基因，观察沉默或敲除后的小鼠血管平滑肌细胞在细胞增殖、迁移、侵袭及钙信号等方面的差异，验证这些差异基因在 SM22α 敲除对血管平滑肌细胞的影响中的具体作用。第三部分：讨论预期结果和意义估计本讨论可以猎取与 SM22α 基因敲除相关的差异表达基因信息，探究 SM22α 基因的生物学功能，并揭示其在血管平滑肌肿瘤及其它疾病的发生进展中的作用。这项工作有望为讨论血管平滑肌细胞的分化和精品文档---下载后可任意编辑疾病机理提供新的思路和方法，同时也为开发相关疾病的治疗方法提供新的目标。
