精品文档---下载后可任意编辑USP4 通过去泛素化 RIg-I 正向调节其介导的抗病毒作用的开题报告题目：USP4 通过去泛素化 RIg-I 正向调节其介导的抗病毒作用背景：病毒感染是引起人类疾病的常见原因之一，因此对宿主体内抗病毒防备机制的讨论十分重要。其中，RIG-I 样受体(IRF)信号通路是一种免疫反应途径，能够探测到病毒带来的 RNA 并促进抗病毒免疫反应的启动。RIG-I 是 IRF 路径中的关键因子，当其与激活的 RNA 成对结合时会形成RIG-I 信号体，使其富集在细胞内，并促进 IRF3 的磷酸化，在位点Ser396 处引发其二聚化，从而促进 IRF3 的核转移，并激活 I 型干扰素的分泌。在这个过程中，RIG-I 的翻译后修饰起着关键作用。近期的讨论表明，去泛素化 enzyme——USP4 能够通过其结合到RIG-I 的 RIG-I CARD 结构域上，去除其固有的 K63 链式泛素修饰，从而增强 RIG-I 的受体活性，进一步提高病毒 RNA 的特异性识别，从而更好地介导细胞对病毒感染的反应。问题：本讨论旨在探究 USP4 如何通过去泛素化 RIG-I 正向调节其介导的抗病毒作用？并深化了解 USP4 在 RIG-I 信号通路中的作用机制，从而为后续的进展和治疗项目提供理论基础。方法：本讨论将使用 CRISPR-cas9 技术对 Huh7 细胞中的 USP4 进行敲除，并观察其对 RIG-I 信号通路中的响应变化。同时，也将讨论 USP4 与RIG-I 之间的相互作用，通过蛋白质共沉淀技术、Co-IP 和 GST pull-down 等手段验证两者的相互作用关系，以及 USP4 如何影响 RIG-I 的去泛素化作用。预期结果：在本讨论中，我们估计能够明确 USP4 在 RIG-I 信号通路中的作用机制和其对 RIG-I 本身的影响方式。同时，我们也可以通过实验来验证USP4 是否能够通过去泛素化 RIG-I 正向调节其介导的抗病毒作用。这将有助于更全面地了解细胞抗病毒免疫反应的形成机制、进展相关的靶向治疗药物等。
