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体外诱导培养鸡胚破骨细胞及钙、磷对其活性的影响的开题报告

体外诱导培养鸡胚破骨细胞及钙、磷对其活性的影响的开题报告_第1页
精品文档---下载后可任意编辑体外诱导培育鸡胚破骨细胞及钙、磷对其活性的影响的开题报告题目:体外诱导培育鸡胚破骨细胞及钙、磷对其活性的影响背景:破骨细胞是一种多核细胞,主要功能为吸收骨组织,维护骨骼的生长、修复和重建。骨组织是人体内最重要的钙储存器,同时也是维持人体钙平衡的重要组成部分。钙和磷是破骨细胞活动的重要物质基础。破骨细胞分离方法:1. 采纳鸡胚隆突法。从 10 日龄的鸡胚中取出下盘肢骨、尾椎及颈椎,去除软骨和血管。将骨骼切成 1mm×1mm 的小块,放入 PBS(磷酸盐缓冲液)中振荡 10min,去除上清液,加入 0.25%胰酶、0.2%胆汁酸和 0.3%牛血清分解,放置 30min。将上清一一收集放入离心管中,离心 1000r/min(不得超过 2min),沉淀即为破骨细胞。2. 采纳颈椎隆突法。方法与鸡胚隆突法相似,只是取颈椎制备骨髓细胞,骨髓细胞在牛血清培育基上 24h 后即分离出破骨细胞。破骨细胞活性测定:采纳碱性磷酸酶染色法(ALP)和酸性磷酸酶染色法(TRAP)。讨论内容:1. 以颈椎隆突法分离破骨细胞,培育 7 天后使用 ALP 和 TRAP 染色法检测破骨细胞的活性。2. 将不同浓度的钙、磷加入破骨细胞的培育基中,观察破骨细胞活性的变化,探究钙、磷对破骨细胞的影响。意义:1. 通过体外诱导培育破骨细胞,可以更好地探究破骨细胞的特性和功能。2. 探究钙、磷对破骨细胞活性的影响,有助于了解骨组织的生长、修复和重建机制,预防和治疗骨质疏松症等疾病。

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