精品文档---下载后可任意编辑问号钩端螺旋体鞘噒酯酶类溶血素 Sph2 原核表达及诱导细胞凋亡活性讨论的开题报告题目：问号钩端螺旋体鞘噒酯酶类溶血素 Sph2 原核表达及诱导细胞凋亡活性讨论摘要：问号钩端螺旋体鞘噒酯酶类溶血素 Sph2 是一种广泛存在于特定细菌属中的膜结合蛋白，其 N 端有一段细菌素结构域，可对靶细胞进行极强的溶血作用。本讨论致力于利用原核表达系统对 Sph2 进行表达，并探究其对细胞凋亡的诱导活性及作用机制。讨论内容：1. Sph2 原核表达系统的构建2. 蛋白表达纯化及其生物学活性检测3. 利用不同浓度的 Sph2 作用于细胞，通过 CCK8 法、流式细胞仪等方法测定 Sph2 对细胞增殖、细胞周期及生存率的影响情况4. 利用 DASPEI 染色、Annexin V/PI 染色等方式对细胞进行凋亡检测，同时利用 Western blot 检测凋亡相关蛋白及信号通路的变化情况预期结果：1. 成功构建 Sph2 原核表达系统，获得纯化有效的重组蛋白2. Sph2 能明显抑制多种细胞的生长及生存率，对某些细胞具有明显的诱导凋亡活性3. Sph2 能抑制细胞周期的进展，特别是在 S 或 G2/M 期的细胞受到 Sph2 的诱导后凋亡的比例较高4. Sph2 能够通过调节凋亡相关的蛋白及信号通路的表达水平，调节细胞凋亡的进程意义：本讨论可以提供关于问号钩端螺旋体鞘噒酯酶类溶血素 Sph2 的生物学活性检测及作用机制的初步探究，为其在药物研发及其他替代清除微生物的应用领域提供借鉴。
