精品文档---下载后可任意编辑阻断 PHB 合成代谢工程改造集胞藻的建立及其应用讨论的开题报告一、讨论背景及意义随着世界人口的迅速增长和生物资源的不断减少，利用可再生的生物质资源生产生物基化学品逐渐成为一种新型的可持续制造模式。聚羟基脂质(Polyhydroxyalkanoates, PHAs)是一类可生物降解的聚酯类聚合物，具有广泛的应用前景。其中聚羟基丁酸(PHB)是应用最广泛的一种PHA。在目前的工业生产工艺中，PHB 主要来源于塑料废弃物的回收。回收利用的产物水平容易受到污染物的影响，且成本较高。而菌类微生物是丰富的生物资源，并且 PHB 是一种常见的代谢产物。因此，利用微生物培育 PHB 成为了一种可行的生产模式。目前，一些传统的微生物如大肠杆菌(E.coli)等已经用于 PHB 生产，但由于该菌种并不自然地产生 PHB，因此需要在其内部注入 PHB 生产代谢途径，这就需要构建基因工程菌株。而且，由于 PHB 在微生物细胞内积累会影响细胞的正常生长和生理代谢，从而影响其 PHB 生产能力和菌种比活性，因此如何降低 PHB 对微生物细胞的负面影响，是构建 PHB 生产工程菌株的另一个重要问题。这里，集胞藻(Chlorella vulgaris)是一种常见的单细胞绿藻，其自然界分布广泛，是重要的生物质资源生产菌株之一。而且，集胞藻在光照条件下可以利用二氧化碳生产微藻油等，也可以利用有机碳进行生物氢气的生产。因此，集胞藻是适合用于 PHB 生产的一种菌种。因此，本讨论将以集胞藻为讨论对象，通过基因工程技术构建 PHB 合成途径，同时探究减轻 PHB 对微生物细胞的负面影响的方法，为集胞藻的 PHB 生产提供一种新的思路。二、讨论内容和方法本讨论主要内容包括：（1）构建 PHB 合成途径基因工程菌株以集胞藻为讨论对象，通过 PCR 扩增和基因克隆技术，将大肠杆菌中的 PHB 生产途径基因转移到集胞藻菌株中，从而构建出新的 PHB 合成途径基因工程菌株。（2）探究降低 PHB 对微生物细胞的负面影响的方法精品文档---下载后可任意编辑讨论 PHB 在集胞藻细胞中的积累情况，确定合适的合成时机和生物反应器参数，同时探究利用调节菌体能量代谢和生理代谢通路等方法，降低 PHB 对微生物细胞的负面影响。（3）讨论 PHB 基因工程菌株的 PHB 生产能力使用高效液相色谱法(HPLC)对 PHB 基因工程菌株的 PHB 产量进行检测和分析，同时通过一系列表型鉴定，评价 PHB 基因工程菌株的 PHB生产能力。三、讨论的意义和预期结...
