精品文档---下载后可任意编辑骨髓间充质干细胞定向分化心脏瓣膜构成细胞的实验讨论的开题报告一、讨论背景心脏瓣膜疾病是一种普遍存在且严重的心脏疾病。目前传统的治疗方法仅仅是实行瓣膜替换手术，但随之而来的可能存在术后并发症、高昂治疗费用以及年龄限制等问题，使得该病病人的治疗方式亟待创新。干细胞治疗因具有高效、可控制、安全等优点，成为近年来治疗心脏瓣膜疾病的新方向。骨髓间充质干细胞 (BM-MSCs) 作为人体内最广泛分布、来源成熟、能够体外扩增的一种干细胞，越来越被人们利用到临床中。二、讨论目的本讨论目的是探究 BM-MSCs 定向分化为心脏瓣膜构成细胞的可能性。通过体外培育 BM-MSCs，将其引导分化为心脏瓣膜构造细胞，通过细胞形态学表征、分子标记以及富集纯化等多方面尝试建立心脏瓣膜细胞维持体外静态自我更新状态的方法，为治疗心脏瓣膜疾病提供新的治疗思路和讨论方法。三、讨论内容和方案1.收集和分离 BM-MSCs通过动物体内或体外方法采集小鼠或人类 BM-MSCs，离心分离、纯化筛选后，经过过筛并经 Fibronectin 处理的干细胞培育基培育。2.BM-MSCs 定向分化为心脏瓣膜构成细胞通过体外培育 BM-MSCs，应用心脏瓣膜化学诱导物，比如 transforming growth factor β(TGF-β) 以及 bone morphogenetic protein(BMP) 的调节，制定心脏瓣膜构成细胞定向分化的培育条件。3. 细胞形态学表征及分子标记检测通过荧光染色等技术，观察培育后的细胞形态学和基因表达情况，并用免疫荧光等技术进一步检测心脏瓣膜标志性分子的表达情况。4.富集纯化心脏瓣膜细胞通过比重离心、流式细胞术等多种手段，对定向分化为心脏瓣膜构成细胞的 BM-MSCs 进行富集纯化，旨在筛选出最具有心脏瓣膜细胞特性的细胞。四、讨论意义BM-MSCs 的定向分化为心脏瓣膜细胞已经被广泛讨论，并且在体外成功进行了定向分化。本讨论的目的是通过体外培育的方式，将 BM-MSCs 引导定向分化为具有心脏瓣膜构成细胞特性的细胞，并通过多种检测手段对其进行确定和验证。讨论成功后，将为心脏疾病的治疗提供新的方向和思路，同时对干细胞定向分化讨论提供新的实践经验，具有较高的理论和应用价值。
