液 相 色 谱 方 法 开 发 （实例讲解） 2010© 未 经 许 可 ， 不 得 复 制 。 转 载 请 注 明 出 处 。 如有问题请联系：y bsmart2004@163.com 1 色谱分离与在线检测技术已经成为当今分析化学的一门重要学科，而因其衍生出的相关产品也日益丰富。对色谱工作者来说，在面对具体方法开发中如何获得适当的分离度则成为关注的焦点。本文仅从网络上的资源收集简要介绍反相液相色谱法的建立思路。 一 、 基 本 术 语基 本 术 语 读 者 可 跳 过 本 部 分 内 容 ， 直 接 阅 读 实 例 讲 解 部 分 在评价色谱分离的品质时，通常用以下相关术语来反映色谱特征（如图 1.）： 图 1. 典型色谱图 1. 保留因子(k)： 00tttkR −= (1) 用于反映化合物的色谱保留性质，跟化合物性质有密切关系。如图 1，设 tR1 =3.65min, t0 =1.20min, 则峰 1 的保留因子为：(3.65-1.20)/1.20=2.04 2. 拖尾因子(Tf) 液 相 色 谱 方 法 开 发 （实例讲解） 2010© 未 经 许 可 ， 不 得 复 制 。 转 载 请 注 明 出 处 。 如有问题请联系：ybsmart2004@163.com 2 abafWWWT2+= (2) 图2. 典型拖尾峰 在理想情况下，色谱峰为高斯型对称峰，其拖尾因子为 1.0，但在实际情况中，由于化合物的二次保留等其他因素，色谱峰大多会呈现一定程度的拖尾。如图2 中，该色谱峰的拖尾因子可计算得：{(41.5-37.0)+(37.0-35.0)}/{2*(37.0-35.0)}=1.63. 3. 理论塔板数（N） 液 相 色 谱 方 法 开 发 （实例讲解） 2010© 未 经 许 可 ， 不 得 复 制 。 转 载 请 注 明 出 处 。 如有问题请联系：y bsmart2004@163.com 3 图3. 峰高与峰宽的关系 2)^(16 WtNR= (3) 或 2)^(54.55.0WtNR= (4) 注意：在上式中W 为图3 中的Wb，为基线峰宽(4σ)，W0.5 为峰高一半处的峰宽Wh(2.335σ), 并非峰宽的一半(2σ)。 设图1 中峰1 的基线峰宽为0.25min, 则塔板数为：16*(3.65/0.25)^2=3410 4. 分离因子(α) 010212ttttkkRR−−==α (5) 又称两个色谱峰的相对保留值。只有当 α>1 时，两个色谱峰才有分离的可能性。 设在图1 中峰2 的保留时间为6.50min, 则分离因子为: (6.50-1.20)/(3.65-1.20)=2.16 液 相 色 谱 方 法 开 发 （实例讲解） 2010© 未 经 许 可 ， 不 得 复 制 。 转 载 请 注 明 ...
