实验7 聚丙烯酰胺凝胶电泳 原理 一 聚丙烯酰胺凝胶电泳（poly acry lamide gel electrophoresis,简称PAGE），由称盘状电泳
这种电泳是在区带电泳的基础上，以孔径大小不同的聚丙烯酰胺凝胶作为支持物，采用电泳基质的不连续体系（即凝胶层的不连续性、缓冲液离子成分的不连续性、pH 的不连续性及电位梯度的不连续性），使样品在不连续的两相间积聚浓缩成很薄的起始区带（厚度为10-2cm），然后再进行电泳分离
圆盘电泳名称来源即由于此法的原理是依靠基质的不连续性（discontinu ity ），凑巧在垂直柱形凝胶上分散出的区带也很象圆盘状（discoid shape），取“不连续性”和“圆盘状”的英文字头“disc”
因此英文名称为“disc electrophoresis”，中文直译为盘状电泳
仪器装置：如图 A 所示，上下两个槽为圆形或方形，其中注入缓冲液（图中曲线表示缓冲液面）
上下槽的缓冲液分别有正负电极通入
下槽外壳在必要时可通入冷水促使降温，水流方向用箭头表示
上槽底部有许多小孔，可插入装有聚丙烯酰胺的玻璃管
图 A 在圆盘电泳过程中有三种物理效应：①样品的浓缩效应，②凝胶的分子筛效应，③一般电泳分离的电荷效应
由于这三种物理效应，使样品分离效果好，分辨率高
下面就圆盘电泳过程中的三种物理效应的原理加以说明： 1
样品的浓缩效应：由于电泳基质的4 个不连续性，使样品在电泳开始时，得以浓缩，然后再被分离
（1）凝胶层的不连续性：浓缩胶：为大孔凝胶，有防止对流的作用
分离胶：为小孔凝胶，也有防止对流的作用
样品在其中进行电泳和分子筛分离
蛋白质在大孔凝胶中受到的阻力小，移动速度快
进入小孔凝胶时遇到的阻力大， 速度就减慢了
由于凝胶的不连续性，在大孔胶与小孔胶的界面处就会使样品浓缩， 区带变窄
（2）缓冲离子成分的不连续性
