生 物 化 学 实 验 预 习报 告 实验二酶活力测定方法的研究（1 ） ——淀粉酶活性的研究 一、研究背景 酶即由活细胞产生的一类有催化活性的生物大分子，大多数由蛋白质组成（少数为RNA），它是细胞赖以生存的基础，细胞新陈代谢包括的所有化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。酶的催化具有高效性、专一性、可调节性以及需要温和的条件。酶的催化活性受外界条件的影响，如温度、pH、离子强度、激活剂、抑制剂等均会使酶活性发生改变。另外，酶在工业生产及生活中应用广泛，如酱油、食醋以及酿酒工业都需要酶的参与，洗衣粉加入酶增强去污能力等。酶活性的测定具有较强的实际意义，例如某些酶活性的变化可以引起特定的疾病，测定这些酶的活性可以作为疾病诊断的一个依据。 淀粉酶是水解淀粉糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的方式，可以分为 α-淀粉酶与 β-淀粉酶等。休眠的种子中只有 β-淀粉酶存在，而 α-淀粉酶在种子萌发过程中才形成。测定淀粉酶的活性具有重要的意义，淀粉酶普遍存在于植物体内，特别是萌发后的禾谷类种子淀粉酶活性最强，其活性高低可以衡量种子萌发速率，也可以作为水稻抗逆性的生化指标（如干旱、盐、重金属胁迫）。本实验中我们通过学习经典的淀粉酶活力测定方法，分析具体的实验细节，从而获取酶活力测定的相关理念。 二、研究目标 1.掌握酶活力测定的一般思路与方法； 2.进一步熟练使用分光光度法测定物质浓度； 3.测定α-淀粉酶与 β-淀粉酶的活性； 4.体会并掌握实验细节的设计与分析方法。 三、研究策略 两种淀粉酶的特性有所不同，α-淀粉酶不耐酸，在 pH3.6 以下迅速钝化；β-淀粉酶不耐热，在 70℃ 15min 钝化。根据它们的这种特性，在测定活力时钝化其中之一，就可测出另一种淀粉酶的活力。本实验采用加热的方法钝化 β-淀粉酶，测出 α-淀粉酶的活力（原因分析见思考题 6）。在非钝化条件下测定淀粉酶总活力（α-淀粉酶活力+β-淀粉酶活力），再减去 α-淀粉酶的活力，就可求出 β-淀粉酶的活力。另外，实验时分别设置对照组和测定组，从而排除无关变量的干扰。采用分光光度法测定产物麦芽糖的含量，计算出产物的生成速率，从而表征出淀粉酶的活性。 四、研究方案及可行性分析 1 .研究方案 （1）酶的获取 淀粉酶广泛存在于禾谷类的种子（特别是萌发后的种子）中，所以取萌发的小麦种子研磨浸提得到初始酶液。 （2）反应过程 α-淀粉酶耐高温，而 β-淀粉酶...
