种子摇瓶制备操作规程目的：制备酶液用于酶解生产糖液，熟悉摇瓶种子制备工艺范围：种子斜面、培养皿制备，一级、二级摇瓶种子制备职责：根据工艺制备合格的摇瓶种子，制得酶液，考察无菌操作内容：1一级种子斜面、培养皿制备1.1 制备前准备1.1.1 需用器具与设备与用途名称数量规格用途备注水浴锅1 台400*200魔芋粉溶解加热培养皿6 套90mm制备平板培养基报纸包裹试管12 支18*180制备斜面培养基电子天平台500g,0.01称量物料容量瓶个100ml定容磷酸二氢钾溶液移液管2 支10ml量取磷酸二氢钾，分量培养基PH 计1 台检测配后 PH电炉1 台1加热溶液配置琼脂烧杯1 个500ml制备培养基量同1 支100ml灭菌锅台1培养基灭菌用锥形瓶个200ml存放培养基1.1.2 配制培养基清单（按 200ml 计算）名称标准数量批号产地备注淀粉蛋白胨安琪酵母浸粉磷酸氢二钠磷酸二氢钾无水碳酸钠氯化钾琼脂粉纯化水1.2.3 称量过程中需填写《斜面种子配制与灭菌记录》。1.2.4 物料批号与厂家根据实际情况调整后做好记录。1.2 培养基配制1.2.1 量取 50ml 纯化水倒入 500ml 烧杯中，放入水浴锅中加热到 50°C。1.2.2 加热少许酶粉，搅拌均匀，加入按配料清单称量好的魔芋粉，在 50C 搅拌 5 分钟后将烧杯拿出水浴锅。1.2.3 将需称量物料按百分比放大 10 倍称量。称取 0.3g 磷酸二氢钾，定容配置为 100ml 溶液，充分溶解后用 10ml 移液管量取 20ml 溶液加入 500ml 烧杯中。1.2.4 除琼脂粉外，按配料单将称量好的原料倒入烧杯溶解。称量时一人称量一人复核，认真核实产品名称、数量和厂家。1.2.5 溶解过程应当缓慢倒入，充分溶解，特别注意酵母浸粉和蛋白胨的溶解，粉末较细尽量不要结团成球。溶解完毕后测量 PH 并记录。1.2.6 溶解完毕后打开电炉，将配置好的培养基溶液放在电炉上加热至沸腾，缓慢倒入琼脂粉，并均匀搅拌，确保充分溶解，防止结团成球。1.2.7 量筒量取 130ml 水加入烧杯中，用试纸测大概 PH,迅速量取 6 或 8ml，分别装入 12 支试管中，盖上试管塞，等待灭菌。1.2.8 将剩余料倒入锥形瓶中，盖上瓶塞等待灭菌。1.3 培养基灭菌1.3.1 将装有琼脂液锥形瓶、12 支装琼脂试管、6 个包裹好的空白培养皿放入灭菌锅内。1.3.2 检查锅内液位，盖上灭菌锅盖，插上电源开始升温。1.3.3 升温到灭菌锅内冷空气排尽，开始有热蒸汽冒出后关闭灭菌锅上两排气阀。1.3.4 当压力上升到 0.11MPa,温度 121C 时开始计时，保温 20 ...
