微生物分析之量测不确定度评估 1、 引 言： 由于微生物检测的特殊性，因此该例只讨论了单一样品重复测定菌落总数不确定度的评估。 2、 技术说明： 该技术说明简单描述了菌落总数测定过程以及单一样品重复测试与其他所依赖的参数的关系。 测定过程；检样 做成几个适当倍数的稀释液 选择2—3 个适宜稀释度，各以1m l 分别加入灭菌平皿内 每皿内加入适量营养琼脂（36±1°C、48±2h） 菌落计数 报告 计算；做平板菌落计数时，用肉眼观察，在记下平板的菌落数后，求出稀释度的各平板平均菌落总数。 3、 不确定度来源和量化； 校准（1m l 移液管）：根据标准查到 A 级 1m l±0.007 m l 移液管的不确定度(假设三角形分布) 0.007 m l/√6=0.0028 m l 由于该例是同一样品单一重复测试的结果，而由于培养引起的不确定度因素在此忽略。由于微生物的称量是粗称，故由称量引起的不确定度在此也忽略。由稀释起的不确定度分量与计数相比在此贡献较小故也忽略。 稀释和培养 计数 菌落总数 称量 一个样品经过微生物测试后得到下列结果： 3.3×104 9.8×10³ 3.0×105 2.0×105 6.5×104 9.6×10³ 5.0×104 8.8×104 9.0×10³ 3.5×105 由微生物学的角度来看，这些结果的差异性并不大。然而将这些数值平均后发现会产生以 105 为单位之不合理偏差。 算术平均值及 log 平均值所表示出的不同结果如表 1 所列： 结 果 以 log 处理之结果 33000 4.5185 65000 4.8129 9000 3.9542 9800 3.9912 9600 3.9823 350000 5.5441 300000 5.4771 50000 4.6990 200000 5.3010 88000 4.9445 ArithAv111440 ie 1.1×105 Log Av4.7225 ie5.3×104 (antilog) 表 1 由以上数值可得到开 log 后的平均值等于 4.7225 具体计算如表 2 所列； 结果x ( x-x ) ( x-x )² 4.5185 -0.204 0.04160 4.8129 0.0904 0.00818 3.9542 -0.7682 0.59019 3.9912 -0.7313 0.53474 3.9823 -0.7402 0.5479l 5.5441 0.8216 0.67500 5.477l 0.7546 0.56948 4.6990 -0.0235 0.00055 5.3010 0.5785 0.33472 4.9445 0.2220 0.04928 总 计 3.35166 表 2 n (xi-x)2 使用公式S=[ ∑ ]1/2 ………………(1) i=1 (n-1) 3.35166 S=√ =0.6103 10-1 查表得知于95%信赖区间时t=2.26。此微生物测试以log 的方式表示， 2.26×0.6 其结果= 4.7225± = 4.72...
