微生物细胞大小测定 一、实验目的 了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理,掌握微生物细胞大小的测定方法。 二、实验原理 微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一,由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。 目镜测微尺(图-1)是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm 长度刻成50 等分,或把10 mm 长度刻成100 等分。测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。 镜台测微尺(图20-2)是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm 等分为100 格,每格长l0μm(即 0.0lmm),是专门用来校正目镜测微尺的。校正时,将镜台测微尺放在载物台上, 图1 目镜测微尺 图2 镜台测微尺 由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。 三、实验器材 1.活材料: 酿 酒 酵 母 (Saccharomyces cerevisiae)、枯 草 杆 菌(Baccillus subtilis)染 色 标本片。 2.器 材: 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦 镜纸 。 四、实验方法 1.目镜测微尺的校正 把目镜的上透 镜旋 下,将目镜测微尺的刻度朝 下轻 轻 地 装 入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝 上。先用低 倍镜观 察 ,对准 焦 距 ,视野中看 清 镜台测微尺的刻度后,转 动 目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平 行 ,移动 推 动 器 ,使两尺重叠,再使两尺的“ 0” 刻度完 全 重合,定位后,仔 细寻 找 两尺第 二 个 完 全 重合的刻度,计 数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微尺的刻度每格长l0μm,所以由下列公 式 可以算 出目镜测微尺每格所代表的长度。 例如目镜测微尺5 小方格正好与镜台测...