提取DNA纯度

试剂盒特点: ◆ 经过特殊处理的纯化柱能有效的去除杂质和腐殖酸。 ◆ 兼容性强，适用于各种不同的粪便。 ◆ 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 ◆ 快速，简捷，单个样品操作一般可在 60 分钟内完成。 ◆ 高纯度，OD260/OD280典型的比值达 1.7～1.9，长度可达 50kb以上，可直接用于 PCR， 1.DNA 提取中会污染任何物质 蛋白 糖类 RNA 等。其纯度一般用核算吸收OD260/OD280（蛋白质污染）分析判断，纯 DNA 比值为 1.8。此外用OD280/OD230 估计盐离子是不是太高。 5.分光光度分析 DNA 的 A280/A260 小于 1.8；不纯，含有蛋白质等杂质。在这种情况下，应加入SDS 至终浓度为 0.5%，并重复步骤 2～8。 你取出1 微升或2 微升，用 EB 稀释100 倍或50 倍到100 微升，OD260/280 的比值在 1.8-2.0 是比较理想的，代表你的 DNA 纯度很高。波长 260nm 时，1OD值相当于双链DNA 浓度为 50μg/ml，算一下，再乘以你的稀释倍数，就 是浓度了 紫 外吸收检 测 DNA 浓度与 纯度 2007 年 11 月 13 日 星 期 二 11:40 目 的： 了 解紫 外吸收检 测 DNA 浓度与 纯度的原 理，掌 握 测 定 方 法 。原 理： 核酸的最 大 吸收波长为 260nm，蛋白质为 280nm，在波长 260nm 时，1OD 值相当于双链DNA浓度为 50μg/ml，单链寡 核苷 酸的含量 为 30μg/ml，可以据 此来 计算核酸样品的浓度,还 可通 过测 定 在 260nm 和 280nm 的 OD 值的比值（OD260/OD280），估计核酸的纯度。纯净 DNA 的比值为 1.8, RNA 为 2.0。若 比值高于 1.8 说 明 DNA样品中的 RNA 尚 未 除尽 ，若 样品中含有酚和蛋白质将 导 致 比值降 低 。270nm 存在高吸收表明 有酚的干 扰 。 紫 外分光光度法 只 能用于测 定 浓度大 于 0.25μg/ml的核酸溶 液 ，对 浓度更 小的样品，可采 用荧 光分光光度法 。试剂与 仪 器 ： 提取的质粒 DNA，紫 外分光光度仪 。操作步骤： 1) 分光光度计先 用水 在 260nm 和280nm 两 个波长下校 零 。2) 取质粒 DNA 样品 2μl，用水 稀释100 倍，转 入分光光度计的石 英 比色 杯 中。3) 在 260nm 和 280nm 分别 读 出样品光密 度值。如 果样品浓度单位 为 μg/μl，则 样品 DNA 浓度为 OD 值的 10 倍，即 如OD₂₆₀=0.1，则 样品浓度即 ...