华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程学 文本教案(第五章) 主讲教师:柳俊博士、教授第5章植物细胞培养与次生产物生产(5 学时)教学目的与要求:深入了解植物细胞在离体条件下的生长特性,掌握植物细胞悬浮系的建立以及种细胞的筛选方法。第一节、悬浮培养(suspension culture)一、悬浮培养悬浮培养是指将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。 1.起始培养物的建立选择适宜的外植体:幼胚、胚轴、子叶是最常使用的外植体。选择适宜的培养基:较高浓度激素浓度;必要的附加物质。愈伤组织的要求:松散性好、增殖快、再生能力强 2.悬浮系的建立 3.悬浮细胞的生长与增殖悬浮培养与固体培养比较有三个优点:一是增加培养细胞与培养液的接触面,改善营养供应;二是在振荡条件下可避免细胞代谢产生的有害物质在局部积累而对细胞自身产生毒害;三是振荡培养可以适当改善气体的交换。Cell suspensionSecondary productsIsolation protoplastsMutation selectArtificial seedsPlants华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程学 文本教案(第五章) 主讲教师:柳俊博士、教授 影响悬浮细胞生长的因素:起始愈伤组织的质量接种细胞密度培养条件:方式、温度、继代周期 一个成功的悬浮细胞培养体系必须满足三个条件:悬浮培养物分散性良好,细胞团较小,一般在 30 ~50 个细胞以下,在实际培养中很少有完全由单细胞组成的植物细胞悬浮系。均一性好,细胞形状和细胞团大小大致相同。悬浮系外观为大小均一的小颗粒,培养基清澈透亮,细胞色泽呈鲜艳的乳白或淡黄色。细胞生长迅速,悬浮细胞的生长量一般 2 ~3 天甚至更短时间便可增加一倍。第三节、植物细胞大规模培养与次生代谢产物生产一、概述植物次生代谢产物是指植物中一大类并非植物生长发育所必需的小分子有机化和物,其产生和分布通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性。次生产物在植物中的合成与分解过程称为次生代谢。1. 植物产生代谢产物的类型植物次生产物种类繁多(据保守估计已超过 2 万种),根据分子结构不同大致分为:酚类化合物-黄酮类 单酚类 醌 类(苯醌、萘醌、蒽醌)华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程学 文本教案(第五章) 主讲教师:柳俊博士、教授萜类化合物-三萜皂甙 甾体皂甙 单萜、倍半萜、二萜含氮化合物-生物碱(真生物碱、伪生物碱、原生物碱) 胺类(伯、仲、叔、季胺) 非蛋...