微柱凝胶卡式法鉴定 ABO 正反血型及 RhD 血型标准操作规程1、目的为规范输血科 ABO 和 RhD 血型鉴定的技术操作,确保鉴定结果准确及临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。2、适用范围本文件适用于本院输血科 ABO 正反血型和 RhD 血型鉴定的操作过程的规范化管理。3、职责:输血科技术人员负责本实验的技术操作。4、试验方法及原理4.1 试验方法:微柱凝胶免疫测试法4.2 原理:本微量定型系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。当抗原抗体反应,则红细胞发生凝集形成红细胞免疫复合物。离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层,呈阳性反应,未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部,呈阴性反应。4.2.1 ABO 血型基础血抗与抗血清反应与 A1,B 细胞反型原应抗-A抗抗-A,BA1BAA++0++0+/++BB0+++++/++0AA++++++00OH000+/+++/++4.2.2Rh 血型Rh 血型系统包括的主要血型抗原:,c,E,e,DCde 二R1Cde=R2CcDdee 二 Rlr 与抗-D 阳性反应的红细胞为 Rh 阳性。5、样本采集和处理:受血者血样为 EDTA-K2 抗凝血。抽取受血者静脉血 1〜2ml 于专用管(紫色头管)内,离心分离出血浆。将细胞配成 0.8%的悬液备用。6、试剂:6.10.9%的生理盐水;6.2 长春博迅公司的血型定型试剂卡;6.3 长春博迅公司的 0.8%的 A、B 型试剂红细胞悬液;7、仪器:7. 1XTL-4.7 细胞洗涤离心机;7.2 长春博迅公司的 FYQ 型免疫微柱孵育器;7.3 长春博迅公司的 TD-3A 型血型血清学专用离心机;8、操作程序:8.1 工作准备:8.1.1 将 0.8%A、B 型试剂红细胞悬液室温平衡。准备样本,标记卡。8.1.2 0.8%样本红细胞制备:将 8ul 压积红细胞加到 1ml 生理盐水中充分混匀。8.1.3 将 50ulAl、B 标准反定细胞加入血型卡的第 5-6 管中,将待检者血浆或血清 50ul 加到血型卡的第 5-6 管中。将 0.8%样本红细胞分别加入到血型卡的第 1-4 管中,各 50ulo8.1.4 将血型卡放入 TD-3A 型血型血清学专用离心机离心 5 分钟后,判断结果,并作好记录。9、结果判断:-100%的红细胞沉在微管的底部+/-100%的红细胞沉在微管的下端 1/3 之内1+80%的红细胞沉在微管的下端 2/3 之内2+80%的红细胞沉在微管的上端 2/3 之内3+80%的红细胞沉在微管的上端 1/3 之内4+凝集的细胞全部处于微管的顶部d.p.双群Hemo.溶血4+3+2+1++/--溶血双群10、方法...