专题一 基因工程【高考目的定位】1、专题重点：DNA 重组技术所需的三种基本工具；基因工程的基本操作程序四个环节；基因工程在农业和医疗等方面的应用；蛋白质工程的原理。2、专题难点:基因工程载体需要具有的条件;从基因文库中获取目的基因；运用 PCR 技术扩增目的基因；基因治疗；蛋白质工程的原理.第1节DNA 重组技术的基本工具教材梳理：知识点一 基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,从而发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做 DNA 重组技术.注意：对本概念应从如下几种方面理解:知识点二 基因工程的基本工具1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀"（1）限制性内切酶的来源:重要是从原核生物中分离纯化来的。(2）限制性内切酶的作用：可以识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。（3）限制性内切酶的切割方式及成果:① 在中心轴线两侧将 DNA 切开，切口是黏性末端。②沿着中心轴线切开 DNA，切口是平末端。2。DNA 连接酶-—“分子缝合针”(1）来源：大肠杆菌、T4 噬菌体（2)DNA 连接酶的种类：E。coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶.（3）作用及作用部位：E.coliDNA 连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA 连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。注意：比较有关的 DNA 酶（1）DNA 水解酶：可以将 DNA 水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成膦酸、操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA 分子水平基本过程剪切→拼接→导入→体现成果人类需要的基因产物脱氧核糖和含氮碱基 （2）DNA 解旋酶：可以将 DNA 或 DNA 的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键.注意:使 DNA 解成两条长链的措施除用解旋酶以外，在合适的高温（如 94℃）、重金属盐的作用下，也可使 DNA 解旋。 （3）DNA 聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成 DNA 长链. (4）DNA 连接酶:是通过磷酸二酯键连接双链 DNA 的缺口。注意比较 DNA 聚合酶和 DNA 连接酶的异同点。3.基因进入受体细胞的载体——“分子运送车”（1）分子运载车的种类：①质粒：常存在于原核细胞和酵母菌中，是一种分子质量较小的环状的裸露的 DNA 分子，独立于拟核之外。②病毒:常用的...
