专题一 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外 DNA 重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的,又叫做 DNA 重组技术
(一)基因工程的基本工具1
“分子手术刀”--限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:重要是从原核生物中分离纯化出来的
(2)功能:可以识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性
(3)成果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端一般有两种形式:黏性末端和平末端
黏性末端:当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,被限制酶切开的 DNA 两条单链的切口,带有几种伸出的核苷酸,他们之间恰好互补配对,这样的切口叫黏性末端
平末端:当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的 DNA 两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端
“分子缝合针”-—DNA 连接酶(1)两种 DNA 连接酶(E·coliDNA 连接酶和 T4—DNA 连接酶)的比较:① 相似点:都缝合磷酸二酯键
② 区别:E·coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低
(2)与 DNA 聚合酶作用的异同: DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键
DNA 连接酶是连接两个 DNA片段的末端,形成磷酸二酯键
DNA 连接酶DNA 聚合酶不一样点连接的 DNA双链单链模板不要模板要模板连接的对象2 个 DNA 片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链 DNA 片段上相似点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质3
“分子运送车”——载体(1)载体具