专题一 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的,又叫做 DNA 重组技术.(一）基因工程的基本工具1。“分子手术刀”--限制性核酸内切酶(限制酶）(1）来源:重要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能:可以识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）成果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端一般有两种形式：黏性末端和平末端。黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的 DNA 两条单链的切口，带有几种伸出的核苷酸，他们之间恰好互补配对，这样的切口叫黏性末端。平末端:当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的 DNA 两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。2。“分子缝合针”-—DNA 连接酶（1）两种 DNA 连接酶（E·coliDNA 连接酶和 T4—DNA 连接酶)的比较：① 相似点：都缝合磷酸二酯键。② 区别：E·coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低.(2)与 DNA 聚合酶作用的异同: DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键.DNA 连接酶是连接两个 DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶DNA 聚合酶不一样点连接的 DNA双链单链模板不要模板要模板连接的对象2 个 DNA 片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链 DNA 片段上相似点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质3。“分子运送车”——载体(1）载体具有的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保留.② 具有一至多种限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。③ 具有标识基因，供重组 DNA 的鉴定和选择.④ 对受体细胞无害.(2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、构造简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子.(3）其他载体：λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1。目的基因是指： 编码蛋白质的构造基因 。（1）获取措施：从基因文库中获取目的基因（2）人工合成法：化学措施合成 DNA 片段（反转录法、直接合成法)(...
