北京理工大学珠海学院 2020 届本科生毕业论文重 组 酶 介 导 的 等 温 核 酸 扩 增 （ RAA） 检 测 布 氏 杆菌 方 法 的 建 立摘 要[ 目 的 ]筛 选 出 现 现 有 的 布 氏 杆 菌 所 有 种 属 的 共 同基 因片 段 ， 设 计 出 适 用 于 扩 增 目 标 基 因 的 布 氏 杆 菌 引物及探针，应用重组酶介导的等温核酸扩增（ RAA ） 技 术 建 立 检 测 布 氏 杆 菌 的 方 法 ， 并 对 该 检测 方 法 进 行 优 化 。[ 方 法 ]（ 1 ） 在 DNA 序 列 数 据 库 中 找 到 布 氏 杆 菌 的 多 序 列基 因 片 段 ， 对 找 到 的 多 个 特 定 基 因 序 列 进 行 对 比分 析 ， 筛 选 出 适 合 通 用 检 测 的 布 氏 杆 菌 基 因 序 列，根 据 筛 选 出 的 基 因 序 列 ， 利 用 设 计 软 件 设 计 引 物及 探 针 ；（ 2 ） 提 取 核 酸 的 方 法 ；（ 3 ） 应 用 重 组 酶 介 导 的 等 温 核 酸 扩 增 技 术 （ RAA技 术 ） 建 立 检 测 布 氏 杆 菌 的 新 方 法 ；（ 4 ） 对 建 立 的 RAA 技 术 检 测 布 氏 杆 菌 的 新 方 法 进行 灵 敏 性 、 特 异 性 、 重 复 性 试 验 ， 对 实 验 样 品 进行 检 验 。[ 结 果 ]本 研 究 成 功 利 用 重 组 酶 介 导 的 等 温 核 酸 扩 增 技术 建 立 了 检 测 布 氏 杆 菌 的 的 新 方 法 。 全 扩 增 反 应在 39℃ 恒 温 进 行 ， 扩 增 时 间 20 分 钟 。 该 方 法 灵 敏 性最 低 可 检 测 到100 拷 贝 的 含 布 氏 杆 菌 的 重 组 质 粒 ，且 该 方 法 的 特 异 性 高 ， 与 现 有 的 布 氏 杆 菌 宿 主 身IV北京理工大学珠海学院 2020 届本科生毕业论文上 常 见 菌 种 及 病 毒 不 发 生 非 特 异 性 扩 增 。 该 方 法的 所 用 引 物 是 以 现 有 布 氏 杆 菌 全 种 型 通 用 为 目 标制 成 ， 在 现 有 样 品 的 测 试 下 ， 都 可 以 检 测 出 阳 性，且 重 复 性 高 。[ 结 论 ]本 研 究 应 用 的 RAA 技 术 检 测 布 氏 杆 菌 ...
