松花菜小孢子发育的细胞学观察打开文本图片集摘要：以松花菜 F1 代杂交种为材料，分别观察自然发育和游离培育条件下小孢子的发育过程。结果表明，自然条件下，四分体释放小孢子后，单核小孢子经历 2 次分裂，从双核期到三核期，最后发育为成熟花粉粒，是配子体发育途径;在游离培育条件下，小孢子经过热激（33℃）处理后，发生均等分裂或者不均等分裂，之后经过一系列的细胞增殖，最终发育成为胚状体，小孢子发育途径是从配子体向胚胎发育转换的途径。同时发现，并不是所有发生了分裂和增殖的细胞都能形成胚状体，只有极少数小孢子最终形成正常胚。Keywords：Loose-curdcauliflower;Microspore;Cytologicalobservation松花菜是十字花科甘蓝属花椰菜的一个类型，其外形特点为花层薄蕾枝长，花球膨大时呈松散状，松花菜外形美观、营养丰富，叶绿素、类胡萝卜素、可溶性糖含量均高于普通花椰菜[1]。食用时口感甜脆，风味鲜美、深受消费者喜爱。目前我国松花菜种植面积已达 10 万 hm2 以上[2]，正逐步替代传统紧实型花椰菜，成为新的消费类型。目前游离小孢子培育技术已普遍应用于松花菜新品种的选育过程[3-5]，该技术纯合速度快，可以大大缩短育种年限、丰富育种资源，是一种快速、高效的育种途径。但游离小孢子培育技术除受材料基因型影响外，还易受培育过程中不确定因素的影响[6-7]。我们对松花菜小孢子培育技术和胚胎发生过程进行讨论，对游离培育过程中小孢子的发育情况进行细胞学观察，以明确小孢子发育时期与细胞形状及花蕾长度的关系，为进一步提高松花菜小孢子培育效率提供参考。1 材料与方法1.1 材料供試材料为甘肃省农业科学院蔬菜讨论所花椰菜课题组引进的松花菜F1 代杂交种雪美 65。于 2024 年 8 月 25 日育苗，9 月 30 日定植于皋兰日光温室，常规管理。12 月下旬植株抽薹开花，选取健壮植株上的花蕾，进行细胞学观察和游离小孢子培育。1.2 方法1.2.1 小孢子发育过程观察 利用 DAPI（4，6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐）荧光染色法观察小孢子发育时期。DAPI 染色液的配制参照孙继峰等[8]的方法，称取 5mg 的 DAPI，加入 5mLddH2O 溶解，配成 1mg/mL的母液，用离心管分装后置于-24℃冰箱保存。将完全溶化后的染色液用ddH2O 稀释成 10μg/μL 的工作液，选取不同大小的花蕾，用镊子小心摘取 2～3 枚花药，置于滴有 DAPI 染液的载破片上，轻轻挤压出花粉，挑出杂质，盖上盖玻片，在避光条件下染色 10mi...
