探讨兔脂肪源性干细胞在颅骨缺损修复中的应用 摘要： 目的: 探讨脂肪源性干细胞作为骨组织工程的种子细胞在修复兔颅骨缺损中的应用前景. 方法: 提取兔脂肪源性干细胞，成骨诱导并检测，将成骨诱导前后的脂肪源性干细胞种植到自制松质骨支架上，将细胞支架复合物和单纯支架材料分别移植至兔颅骨缺损部位. 结果: 与未诱导的脂肪源性干细胞复合支架、单纯支架以及空白处理对比，成骨诱导后的脂肪源性干细胞复合支架修复骨缺损面积最大，差异具有统计学意义. 结论: 脂肪源性干细胞可作为骨组织工程的种子细胞，其成骨诱导后与自制松质骨复合植入体内，能显着促进骨缺损的修复.关键词： 脂肪源性干细胞；异种松质骨；支架材料；骨代用品；生物医学工程；成骨诱导；种子细胞 0 引言 如何获得充足的种子细胞是长期以来限制组织工程讨论的瓶颈，骨髓基质干细胞尽管已被广泛应用于组织工程讨论，但由于其干细胞含量过低、骨髓抽取量有限以及对患者造成的创伤等，使其广泛应用到受限. 2001 年 Zuk 等［1］从脂肪组织中成功提取了干细胞，并成功诱导其向骨、软骨、脂肪、心肌等多个方向诱导分化. 我们将成骨诱导的脂肪源性干细胞与异种松质骨支架复合，移植至兔颅骨缺损部位，以探讨成骨诱导脂肪源性干细胞修复骨缺损的应用前景. 1 材料和方法 材料新西兰大白兔 12 只，4 mo 龄，体质量～ kg；Dolbecco 改良的 Eagle 培育基，胎牛血清，地塞米松，抗坏血酸，β甘油磷酸钠；碱性磷酸酶活性测定试剂盒，牛股骨，甲醇，氯仿，300 g/L H2O2 等. 方法 的分离培育［1］将新西兰大白兔按 mL/kg 速眠新麻醉，取颈部后正中 3 cm 切口，无菌切取肩胛上脂肪组织约 2 mL. 清除切取组织中肉眼可见的小血管，去除外包膜和明显的结缔组织，D Hank s 冲洗 3遍以洗去红细胞的污染. 切碎成糊状，加入 2 g/LⅠ 型胶原酶 5 mL，在 37℃水浴搅拌消化 40 min，过滤，加入两倍体积 DMEM培育液；② 支架+ADSCs；③ 单纯支架；④ 对比组. A，B 组植入上述成骨诱导和未诱导的脂肪源性干细胞复合异种松质骨支架，所用细胞均为自体细胞；C 组植入单纯的松质骨支架，为前述松质骨成品 PBS 液中浸泡 7 d，9 g/L NaCl 溶液中浸泡 3 d 后植入；D 组不做处理. 术前术后肌注庆大霉素，2 万 U/kg. 术后 14 wk 用过量戊巴比妥钠麻醉处死动物，取材，X 线摄片，计算成骨面积，HE 染色行组织学分析. 统...
