大肠埃希菌 形态与染色特性:1、周身鞭毛2、能运动3、无芽孢,不产生荚膜。4 、 菌 体 两 端 钝 圆 、 中 等 大 小 , 杆 状 ( 有 时 呈 卵 圆 形 ) 、 1-3umx0.6um5、革兰氏阴性培育特性:1)需氧及兼性厌氧菌2)对营养的要求不高,最适生长温度为 37℃,最适 pH 为 7.2—7.4。3)在普通琼脂平板上培育 24 小时,可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落.其菌落与沙门氏菌比较相似。4)在肉汤培育基中生长 18~24 小时变为均匀浑浊,而后底部出现粘性沉淀物,并伴有臭味生化反应:1.对糖的代谢能力:大部分菌株发酵乳糖产酸产气,并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。2.IMViC 试验为“+、+、-、-”。即为典型大肠杆菌。生化试验: ① 靛基质试验为阳性,玫瑰红色吲哚,培育基为蛋白胨水培育基。(液面呈玫瑰红色为阳性,呈试剂本色为阴性。) 原理:大肠埃希菌能分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。② 甲基红试验为阳性,呈鲜红色或橘红色,培育基为磷酸盐葡萄糖胨水培育基。(呈鲜红色或橘红色为阳性,呈黄色为阴性) 原理:某些细菌在糖代谢过程当中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步被分解为大量混合酸,使培育基 pH 下降至 4.5 以下,加入甲基红指示剂可呈红色。③ 乙酰甲基甲醇生成试验(V-P) 为阴性(无红色),要加入 α-萘酚乙醇试液 1ml,混匀,再加 40%氢氧化钾试液 0.4ml。培育基为磷酸盐葡萄糖胨水培育基。(在 4h(通常在 30min 时)内出现红色判为阳性,无红色判为阴性) 培育基菌落形态曙红亚甲蓝琼脂紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,常有金属光泽麦康凯琼脂鲜桃红色或微红色,菌落中心呈深桃红色,圆形,扁平,边缘整齐,表面光滑,湿润原理:葡萄糖→丙酮酸(脱羧)→乙酰甲基甲醇→2,3—丁烯二醇,在有碱存在时氧化成二乙酰,后者和胨中的胍基化合物起作用产生粉红色的化合物。④ 枸橼酸盐利用实验为阴性,培育基原来为绿色,不变色为阴性,培育基为枸橼酸盐培育基斜面。(培育基变蓝色,为阳性;不变,为阴性)原理:细菌分解柠檬酸盐生成碳酸盐,进而氨盐分解,产生氨,培育基变碱,显深蓝色。