专题 1 基因工程 1.1 DNA 重组技术的基本工具 1.2 基因工程的基本操作程序【高考新动向】1、基因工程的诞生2、基因工程的原理及技术【考纲全景透析】一、基因工程的工具1、基因工程的概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程在 DNA 分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做 DNA 重组技术。2、DNA 重组技术的基本工具（1）限制酶——分子手术刀全称：限制性核酸内切酶来源：主要从原核生物中分离纯化出来特点：识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。结果：产生黏性末端或平末端（2）DNA 连接酶——分子缝合针类型：根据酶的来源不同，可分为 E·coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶作用：连接双链 DNA 片段，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二脂键。（3）载体——分子运载体种类：通常利用质粒作为载体，另外还有 λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等质粒：化学本质：小型环状 DNA 分子 特点：能自我复制 有一个至多个限制酶切割位点 有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取途径（1）目的基因： 编码蛋白质的结构基因 。（2）获取目的基因的方法：从基因文库中获取利用 PCR 技术扩增目的基因通过 DNA 合成仪人工合成（3）PCR 技术扩增目的基因1① 原理：DNA 双链复制② 过程：第一步：加热至 90～95℃DNA 解链；第二步：冷却到 55～60℃，引物结合到互补 DNA 链；第三步：加热至 70～75℃，热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成。2、基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。（2）组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因（如抗生素基因）① 启动子：是一段有特殊结构的 DNA 片段，位于基因的首端，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出 mRNA，最终获得所需的蛋白质。② 终止子：也是一段有特殊结构的 DNA 片段 ，位于基因的尾端。③ 标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。3、将目的基因导入受体细胞生物种类植物细胞动物细胞微生物细...
