2013 高考生物二轮复习精品资料专题 14 现代生物科技(教学案,教师版) 【2013 考纲解读】基因工程(1)基因工程的诞生 I(2)基因工程的原理及技术 Ⅱ(3)基因工程的应用 Ⅱ(4)蛋白质工程 I克隆技术(1)植物的组织培养 Ⅱ(2)动物的细胞培养与体细胞克隆 I(3)细胞融合与单克隆抗体 Ⅱ胚胎工程(1)动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础 I(2)胚胎干细胞的移植 I(3)胚胎工程的应用 Ⅱ生物技术的安全性和伦理问题(1)转基因生物的安全性 I(2)生物武器对人类的威胁 I(3)生物技术中的伦理问题 I生态工程(山东考纲不要求)(1)简述生态工程的原理 Ⅱ(2)生态工程的实例 IDNA 的粗提取与鉴定【知识网络构建】 【重点知识整合】一、基因工程 1.基因工程的基本工具 限制酶 DNA 连接酶 (运)载体 作用 切割目的基因和载体 拼 接 DNA 片 段 形成 重组 DNA 携带目的基因进入受体细胞 作用部位 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 ------------------作用特点 (条件) ① 识别特定的核苷酸序列 ② 在特定位点上切割 ①E·coli DNA 连接酶只能连接黏性末端 ②T4 DNA 连接酶能连接黏性末端和平(口)末端 ① 能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 ② 有一个或多个限制酶切割位点 ③ 具有特殊的标记基因 2.基因工程的操作步骤 (1) 目的基因的获取: ① 从基因文库中获取。 ② 利用 PCR 技术扩增。 ③ 用化学方法直接人工合成。 (2) 基因表达载体的构建: ① 基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。 ② 基因表达载体的构建方法: (3)将目的基因导入受体细胞: 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(用 Ca2+处理) 受体 细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞 (4) 目的基因的检测与鉴定: ① 目的基因插入检测:DNA 分子杂交。 ② 目的基因转录检测:(核酸)分子杂交。 ③ 目的基因翻译检测:抗原—抗体杂交。 ④ 个体生物学水平检测:根据目的基因表达出的性状判断。 二 细胞工程1.动物细胞培养与植物组织培养的比较 项目 动物细胞培养 植物组织培养 培养前处理 无菌、用胰蛋白酶处理,使组织细胞相互分散开 无菌、离体 培养基成分 葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素、动物血清等 矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素等 培养基状态 液体培养基 ...