专题 5 DNA 和蛋白质技术【高考新动向】1、蛋白质的提取和分离2、PCR 技术的基本操作和应用【考纲全景透析】一、DNA 的粗提取与鉴定1、实验原理：(1)DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同，在 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中的溶解度最低。(2)DNA 不溶于酒精溶液。(3)DNA 不被蛋白酶所水解。(4)DNA 在沸水浴条件下可被二苯胺染成蓝色。2．DNA 与蛋白质在不同 NaCl 溶液中溶解度不同 3.DNA 的析出与鉴定(1)析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液等体积的冷却酒精溶液(体积分数为 95%)静置 2～3 min，溶液中会出现白色丝状物(此即粗提取的 DNA)，用玻璃棒沿一个方向搅拌卷起丝状物。(2)鉴定二、多聚酶链式反应扩增 DNA 片段1、PCR：多聚酶链式反应的简称，是一种体外迅速扩增 DNA 片段的技术。1原理：DNA 的热变性2、PCR 反应过程（1）变性：当温度上升到 90℃以上时，双链 DNA 解聚为单链（2）复性：温度下降到 50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链 DNA 结合（3）延伸：温度上升到 72℃左右时，溶液中的 4 种脱氧核苷酸（A,T,C,G）在 DNA 聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的 DNA 链。3、PCR 结果：DNA 聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的 DNA 序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。三、血红蛋白的提取和分离实验1、方法及原理方法原理凝胶色谱法根据相对分子质量的大小分离蛋白质电泳法各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同来分离蛋白质2、操作程序：（1）样品处理：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液（2）粗分离——透析：除去样品中相对分子质量较小的杂质。（3）纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。（4）纯度鉴定：一般用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定蛋白质的分子量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。3、细胞内 DNA 复制与 PCR 技术的比较细胞内 DNA 复制PCR不同点[解旋在解旋酶作用下边解旋边复制80℃~100℃高温解旋，双链分开酶DNA 解旋酶、DNA 聚合酶TaqDNA 聚合酶引物RNADNA 或 RNA温度体内温和条件高温相同点（1）需提供 DNA 复制的模板（2）四中脱氧核苷酸作原料（3）子链延伸的方向都是从 5ˊ 端到 3ˊ 端2（4）都需要酶的催化【热点难点全析】一、DNA 和蛋白质的技术1、比较细胞内 DNA 复制与 DNA 扩增（PCR）2.血红蛋白的提取和分离方法(1)凝胶色谱法① 含义：根据相对分子质量...
