基因工程和蛋白质工程考纲要求：1、基因工程的诞生 Ⅰ 2、基因工程的原理及技术Ⅱ 3、基因工程的应用Ⅱ4、蛋白质工程Ⅰ一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，通过体外 DNA 重组和转基因技术，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术。（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”—— （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 ，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式： 2.“分子缝合针”—— （1）功能：缝合 （2）与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”—— （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。③具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。（2）最常用的载体是 ,它是一种有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。（3）其它载体： 噬菌体、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指： 编码蛋白质的基因 。2.原核基因采取直接分离法获得，真核基因是人工合成法。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。 限制酶 运载体直接分离法：供体细胞中的 DNA→ DNA 片段→ 受体细胞→DNA 片段扩增反转录法：逆转录 合成 mRNA → 单链 DNA → 双链 DNA化学合成法：根据已知的蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的 mRNA 序列，推测出结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，合成目的基因。第二步：重组载体的构建1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用2.组成：目的基因＋标记基因标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞_常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。受体细胞可以是卵细胞（受精卵）、体细胞（经组织培养成为完整个体）将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 ...
