基因工程、细胞工程检测题1．(12 分)(2014·南通模拟)利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素，需要构建一种能高水平表达的表达载体，选择合适的基因启动子至关重要。由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列，运用 PCR 技术单独克隆启动子存在困难。科研人员经过长期研究，终于发明了下图所示的一种克隆启动子的方法。请回答：(1)培育转基因奶牛时，需要在生长激素编码序列前插入________的启动子。(2)由基因表达产物无法推知启动子碱基序列，其原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(1) 过程①需选择的限制酶是____________，过程③需选择的限制酶是____________。过程④需要使用的工具酶是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计____________进行扩增。扩增过程中，在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。【解析】 (1)利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素，应使生长激素基因与乳腺蛋白基因相连接，以使乳腺细胞在产生乳腺蛋白的同时产生人的生长激素。(2)启动子部分不能被转录，与蛋白质分子的氨基酸序列不存在对应关系，因此由基因表达产物无法推知启动子碱基序列。(3)根据图示，过程①切出启动子和基因编码序列，应使用限制酶 BamHⅠ，其他两种限制酶会破坏基因编码序列；通过过程③使启动子序列置于克隆 DNA 片段中间、已知序列的基因编码序列位于两端，应使用限制酶 HindⅢ。限制酶 MboⅠ 与 BamH Ⅰ 有相同的酶切位点，会使环状结构恢复原状。(4)PCR 过程中，需要根据模板 DNA 已知的碱基序列设计引物；在扩增过程中，在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。【答案】 (1)乳腺蛋白基因 (2)基因中启动子的碱基序列不能被转录(3)BamHⅠ HindⅢ 耐高温的 DNA 聚合酶(TaqDNA 聚合酶)(4)引物 三2．(12 分)(2014·滨州模拟)转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示(① 至④代表过程，A 至 C 代表结构或细胞)：(1)图中①过程用到的酶是________，所形成的 B 叫做_____...
