课 题DNA 的粗提取与鉴定备课时间上课时间总课时数课程目标知识与技能1、通过尝试对植物或动物组织中的 DNA 进行粗提取，了解 DNA 的物理化学性质。2、理解 DNA 粗提取与鉴定的原理过程与方法 掌握 DNA 如提取计数，能利用 DNA 的性质进行实验设计和操作情感态度与价值观通过对 DNA 的粗提取的实验过程的设计及操作，锻炼科学的思维方法，培养实事求是的科学态度。教学重点DNA 的粗提取和鉴定方法教学难点 DNA 的粗提取和鉴定方法教学过程二次备课一、情境导入无论是果胶酶还是加酶洗衣粉中的酶制剂，都是从细胞中提取出来的。从今天开始，我们学习生物化学成分的提取与改造技术。二、授新课1．基础知识1．1DNA 粗提取的原理提取 DNA 的原理包括 DNA 的溶解性和耐受性两个方面。问：提取 DNA的溶解性原理包括哪些方面？DNA 在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度不同；DNA 不溶于酒精。1．1．1 分析图 5－1。DNA 在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度有何特点？要使 DNA 溶解，需要使用什么浓度？要使 DNA 析出，又需要使用什么浓度？在 0.14mol/L 时溶解度最小；较高浓度可使 DNA 溶解；0.14mol/L 可使DNA 析出。1．1．2 在溶解细胞中的 DNA 时，人们通常选用 2mol/LNaCl溶液；将 DNA 分子析出的方法是向溶有 DNA 的 NaCl 溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释 NaCl 溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但 DNA 却不能溶于酒精（特别是 95％冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。问：采用 DNA 不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？将 DNA 和蛋白质进一步分离。1．1．3 提取 DNA 还可以利用 DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对 DNA 产生影响。温度值为 60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而 DNA 不会变性。补充：DNA 的变性是指 DNA 分子在高温下解螺旋，其温度在 80℃以上，如在 PCR 技术中 DNA 变性温度在 95℃。思考：观察图 5-2，洗涤剂在提取 DNA 中有何作用？洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从而瓦解细胞膜。1．2DNA 的鉴定原理当鉴定提取出的物质是否是 DNA 时，需要使用什么指示剂进行鉴定？在沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺呈现蓝色。原理总结。通过利用不同浓度 NaCl 溶液溶解或析出 DNA，可以从细胞中提取和提纯 DNA；再利用酒精进一步将 DNA 与蛋白质分离...
