第三讲 基因工程及其应用知识点一 基因工程的基本操作工具1．限制性核酸内切酶(1)来源：主要从原核生物中分离纯化而来。(2)作用：识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)结果：产生黏性末端或平末端。2．DNA 连接酶常用类型E·coli DNA 连接酶T4DNA 连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能连接黏性末端连接黏性末端和平末端结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键3.载体(1)常用载体——质粒(2)其他载体：λ 噬菌体衍生物、动植物病毒等。知识点二 基因工程的操作步骤[动漫演示更形象 见课件光盘](1)方法(2)组成(3)方法(4)方法一、理解运用能力判断有关基因工程叙述的正误。(1)限制酶只能用于切割目的基因(×)(2)DNA 连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来(×)(3)E·coli DNA 连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端(×)(4)质粒是小型环状 DNA 分子，是基因工程常用的载体(√)(5)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达(√)(6)利用 PCR 技术能合成目的基因(√)(7)目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法(√)(8)检测目的基因是否导入受体细胞可用抗原—抗体杂交技术(×)(9)蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质(√)(10)蛋白质工程的操作对象是蛋白质分子(×)二、读图析图能力据农杆菌转化法示意图回答下列问题：(1)农杆菌 Ti 质粒中 T－DNA 具有怎样的特点？答案：能转移到受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的 DNA 上。(2)农杆菌转化法的基本原理是什么？答案：利用农杆菌 T－DNA 的可转移性，将目的基因插入 T－DNA 上通过农杆菌的转化，将目的基因导入受体细胞，并整合到植物细胞的染色体上。(3)农杆菌转化法主要适用于哪类植物？答案：双子叶植物和裸子植物。[理清脉络] 考点一|基因工程的操作工具1．限制性核酸内切酶(1)识别序列的特点：呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如图，中轴线两侧的双链 DNA 上的碱基是反向对称重复排列的。如以中心线为轴，两侧碱基互补对称；\s\up7(CCAGG)以\s\up7(A)为轴，两侧碱基互补对称。(2)切割后产生末端的种类——黏性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将 DNA 的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时，产生的是平末端。2．限制酶与 DNA 连接酶的关系GCGCCGCG3．载体具备的条件条件适应性稳定并能复...
