蛋白相关试剂、缓冲液的配制方法

蛋白相关试剂、缓冲液的配制方法20% （W/V） Glucose配制量 100ml配制方法:1. 称取 20 g Glucose 置于 100～200 ml 烧杯中，加入约 80 ml的去离子水后，搅拌溶解。2. 加去离子水将溶液定容至 100 ml。3. 高温高压灭菌后，4℃保存。0.5 M EDTA （pH8.0）配制量 1 L配制方法:1. 称取 186.1 g Na2EDTA•2H2O，置于 1 L 烧杯中。2. 加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌。3. 用 NaOH 调节 pH 值至 8.0（约 20 g NaOH）。4. 加去离子水将溶液定容至 1 L。5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。6. 室温保存。注意：pH 值至 8.0 时，EDTA 才能完全溶解。1 M DTT配制量 50ml配制方法:1. 称取 7.71g DTT，加入到 100ml 烧杯中。2. 加 50 ml 的 0.01 M NaAc（pH5.2），溶解后根据使用情况0.22um 滤膜过滤除菌。3. 适量分成小份后，-20℃保存。30%丙烯酰胺（29：1）配制量 1 L配制方法:1. 量取下列溶液，置于 1 L 烧杯中。Acrylamide 290gBisacrylamide 10g2. 向烧杯中加入约 600 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3. 加去离子水将溶液定容至 1 L，用 0.45um 滤膜滤去杂质。4. 于棕色瓶中 4℃保存。注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液组份浓度 0.125 M Tris, 1.25 M Glycine,0.5%（W/V）SDS配制量 1 L配制方法：1．称量下列试剂，置于 1 L 烧杯中。2．取下列溶液，加入烧杯中。Tris 15.1gGlycine 94gSDS 5g3. 加入约 800 ml 的去离子水，搅拌溶解。4. 加去离子水将溶液定容至 1 L 后，室温保存。4×SDS-蛋白上样缓冲液组份浓度Tris-HCl（pH6.8） 200mMSDS 8%溴酚蓝 0.4%甘油 40%巯基乙醇 4%配制量 10ml配制方法：1.量取下列试剂，置于 10 ml 塑料离心管中。Tris-HCl（pH6.8） 2mlSDS 0.8溴酚蓝 40mg甘油 4ml2. 加去离子水溶解后定容至 10 ml。3. 小份（500 ml/份）分装后，于室温保存。4. 使用前将 20ul 的 β-巯基乙醇加到每小份中。注意：加入 β-巯基乙醇的上样缓冲液可在室温下保存一个月左右。此缓冲液可以用 DTT 替代 β-巯基乙醇。10ml 上样缓冲液中加入 0.617mgDTT,溶解后分分装，可-20℃保存一年。使用时30ul 样品加入 10ul Loading Buffer 混匀，沸水...