蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂破裂细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了 5 种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋 白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂PMSF PMSF 即 Phenylmethanesulfonyl fluoride，中文名为苯甲基磺酰氟。分子式为 C7H7FO2S，分子量为 174.19，纯度>99% 。常用生化试剂，用于抑制蛋白酶. 【配制方法】用异丙醇溶解 PMSF 成 1.74mg/ml（10mmol/L），分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达 17.4mg/ml 的贮存液（100mmol/L ）。【注意】PMSF 严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了 PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被 PMSF 污染的衣物应予丢弃。PMSF 在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF 在水溶液中的活性丧失速率随 pH 值的升高而加快，且 25℃的失活速率高于 4℃。pH 值为 8.0 时，20μmmol/l PMSF 水溶液的半寿期大约为85min，这表明将 PMSF 溶液调节 为碱性（pH>8.6 ）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。蛋白水解酶抑制剂啊!!!实验室常用的啊!!! 主要用于组织匀浆时用!!1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml 溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中加入新奇的 PMSF 。EDTA 1)抑制金属蛋白水解酶; 2)0.5mol/L 水溶液，pH8~9; 3)溶液在 4℃稳定六个月以上; 4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml); 5)加入 NaOH 调节溶液的 pH 值，否则 EDTA 不溶解。胃蛋白酶抑制剂(pepstantin) l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织蛋白酶 D 和凝乳酶; 2)1mg/ml 溶于甲醇中; 3}储存液在 4℃一周内稳定，-20℃稳定 6 个月; 4)1 作浓度:0.7ug/ml(1umol/L) 5) 在水中不溶解。亮抑蛋白酶肽(leupeptin) 1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶，如木瓜蛋白...