特训14现代生物科技专题的综合应用1．下图是某科研所以小鼠为材料制备某抗原的单克隆抗体及研究胚胎干细胞分化条件的流程图。请回答下列相关问题：(1)①过程需用________________处理以将组织块分散成单个细胞。图中选用的A细胞一般是传代__________的细胞。图中去核卵母细胞是通过____________法去除卵母细胞中的核得到的。(2)胚胎干细胞在形态上的特点是________________________________。③过程需要向培养液中加入________________，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质，从而诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化。(3)④过程常用的生物诱导因素是________________。④过程中产生的融合细胞的类型有__________________________________________________________________________________________________________________________________(用X、Y细胞表述)。(4)简述⑤过程中要进行哪两次筛选？________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)胰蛋白酶或胶原蛋白酶10代以内显微操作(2)体积小、细胞核大、核仁明显分化诱导因子(3)灭活的病毒X自身融合细胞、Y自身融合细胞、X—Y融合细胞(4)一次是通过具有筛选作用的培养基筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过抗原—抗体杂交筛选出能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞解析(1)动物细胞培养时，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将组织块分散成单个细胞。用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，以保持细胞正常的二倍体核型。核移植过程中采用显微操作法去除卵母细胞中的细胞核。(2)胚胎干细胞的形态特点是体积小、细胞核大、核仁明显。胚胎干细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。向培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化。(3)动物细胞融合常用的生物诱导因素是灭活的病毒。由X、Y细胞产生的融合细胞有X自身融合细胞、Y自身融合细胞、X—Y融合细胞。(4)单克隆抗体的制备需要进行两次筛选，第一次筛选是通过具有筛选作用的培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选是通过抗原—抗体杂交筛选出能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞。2．基因工程和植物细胞工程技术在科研和生产实践中有广泛应用，请据图回答下列问题：获取目的基因与载体结合①,重组载体②,受体细胞筛选,重组体③,愈伤组织④,胚状体萌发,植物体(1)①②过程采用最多的是农杆菌转化法，原因是农杆菌中Ti质粒上的______________可转移到受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上；检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术，要用______________________________作探针。(2)图中③④过程需在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加__________________等物质，作用是______________________。(3)若要获取转基因植物人工种子，需培养到__________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到________阶段即可。(4)若采用植物体细胞杂交技术获得新的植物体，细胞间杂交一般采用____________作为诱导剂诱导细胞融合。答案(1)TDNA(或可转移的DNA)放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段(2)植物激素(植物生长调节剂)促进细胞分裂、生长、分化(3)胚状体愈伤组织(4)聚乙二醇解析(1)农杆菌中的Ti质粒是基因工程中常用的载体，它之所以具有运载作用，是因为Ti质粒上有一段可转移的DNA片段，即TDNA能够与目的基因一起整合到受体细胞的染色体DNA上；在分子水平上检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术，要用放射性同位素标记的目的基因作探针，如果出现DNA杂交带，则表示目的基因导入了受体细胞。(2)图中③④过程分别表示植物组织培养过程的脱分化和再分化过程，培养基中必须加入植物激素，以便调节脱分化和再分化的过程，有利于新生植物体的构建。(3)植物组织培养过程在不同的阶段有不同的培养用途，如要获得大量的细胞产物，则培养到愈伤组织阶段即可，如要制备人工种子，则要培养到胚状体阶段。(4)植物体细胞杂交...
