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高考生物 实验复习一 提取、分离、鉴定类实验素材

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实验一 提取、分离、鉴定类实验专题一、实验原理及重要实验步骤实验一:检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质(一)、还原糖的检测和观察1、实验原理还原糖(常见的有 、 、 等)与 (试剂)在 (条件),生成 沉淀。2、斐林试剂的使用(1)斐林试剂甲液—— 斐林试剂乙液—— (2)使用原则——① ;② ;(二)、脂肪的检测和观察1、实验原理脂肪可被 (试剂)染成 (或被 染成 )2、取材(1)选择富含 的生物组织或器官,如:花生种子,干种子需要浸泡;(2)种子要足够大,便于做徒手切片。3、方法步骤方法一、向待测组织样液中滴加 3 滴苏丹Ⅲ染液,观察样液被染色的情况。方法二、制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况。(一定要用显微镜吗?)(1)取材切片(2)染色:用 的酒精,目的是: ,原理是 。(3)低倍镜观察——寻找花生子叶薄片的 ,移至 ;(4)高倍镜观察(三)、蛋白质的检测和观察1、实验原理(1)蛋白质与 (试剂)发生作用,可以产生 反应;2、双缩脲试剂的使用(1)双缩脲试剂 A— ,双缩脲试剂 B— (2)使用原则:先加入 ,再加入 ;(条件:不需加热)实验二:提取和分离叶绿体中的色素1、原理:提取原理:叶绿体中的色素能溶解于 (如 、 等)。分离原理:叶绿体中的色素在 中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得 ;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得 。2、方法步骤:(1)提取绿叶中色素:称取绿叶 5g→剪碎置于研钵→放入少许 和 →加入 10mL →充分研磨→过滤→收集滤液(试管口用面塞塞严)(2)制备滤纸条:(3)画滤液细线:(4)分离色素:滤纸条轻轻插入盛有层析液的小烧杯中,用培养皿盖住小烧杯。3、结果分析:色素在滤纸条上的分布如下图: (橙黄色) 最快(溶解度 ) (黄 色) (蓝绿色) 最宽(含量 ) (黄绿色) 最慢(溶解度 )实验三:DNA 的粗提取与鉴定1、提取 DNA 的方法(1)DNA 的溶解性: DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。此外,DNA 不溶于 溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将 DNA与蛋白质进一步的分离。(2)DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性: 蛋白酶能水解 ,但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 60—80oC 的高温,而 DNA 在 以上才会变性。洗...

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