第 1 讲 基因工程[考纲展示] 1
基因工程的诞生(Ⅰ) 2
基因工程的原理及技术(含 PCR 技术)(Ⅱ) 3
基因工程的应用(Ⅱ) 4
蛋白质工程(Ⅰ)考点一| 基因工程的基本工具1.基因工程的概念(1)概念:是指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞,并使重组基因在受体细胞中表达,产生人类需要的基因产物的技术
(2)遗传原理:基因重组
(3)优点① 与杂交育种相比:克服了远缘杂交不亲和的障碍
② 与诱变育种相比:定向改造生物的遗传性状
2.基因工程的基本工具(1)限制性核酸内切酶(简称限制酶)
① 来源:主要来自原核生物
② 特点:具有专一性,表现在两个方面:识别——双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列
切割——特定核苷酸序列中的特定位点
③ 作用:断裂特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
④ 结果:产生黏性末端或平末端
(2)DNA 连接酶种类E · coli _DNA 连接酶 T4DNA 连接酶 来源大肠杆菌T4噬菌体特点缝合黏性末端缝合黏性末端和平末端作用缝合双链 DNA 片段,恢复两个核苷酸之间的磷酸二酯键(3)载体① 种类:质粒、λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等
② 质粒的特点③ 作用:携带外源 DNA 片段进入受体细胞
[思考回答]1.原核生物中限制酶为什么不切割自身的 DNA
提示:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已被修饰等
2.图甲表示 EcoR Ⅰ 限制酶及 DNA 连接酶的作用示意图,图乙表示 Sma Ⅰ 限制酶的作用示意图
请据图回答问题:(1)请写出 EcoR Ⅰ 限制酶和 SmaⅠ 限制酶识别的碱基序列以及切割位点
提示:EcoR Ⅰ 限制酶识别的碱基序列是 GAATTC,切割位点在 G 和 A 之间;Sma Ⅰ 限制酶识别的碱基序列是 CCCGGG,切割位点在 G 和 C 之间