第 34 讲 基因工程[考纲明细] 1
基因工程的诞生(Ⅰ) 2
基因工程的原理及技术(含 PCR 技术)(Ⅱ) 3
基因工程的应用(Ⅱ) 4
蛋白质工程(Ⅰ) 5
实验:DNA 的粗提取与鉴定考点 1 基因工程的操作工具1.基因工程概念基因工程的别名基因拼接技术或 DNA 重组技术 操作环境生物体外操作对象基因操作原理基因重组操作水平DNA 分子水平 基本过程剪切→拼接→导入→表达目的创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品优点克服远缘杂交不亲和障碍,定向改造生物的遗传性状2.限制酶(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化而来
(2)作用:识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列 ,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开
(3)形成末端类型3.DNA 连接酶(1)作用:将双链 DNA 片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸间的磷酸二酯键
(2)种类种类E·coliDNA 连接酶T4DNA 连接酶来源大肠杆菌T4 噬菌体特点只“缝合”黏性末端黏性末端和平末端都可“缝合”(3)DNA 连接酶和限制酶的关系4.载体(1)条件:能在受体细胞中复制并稳定保存;具有一至多个限制酶切割位点;具有标记基因
(2)种类(3)作用:携带外源 DNA 片段进入受体细胞
(4)特点:可在受体细胞中进行自我复制或整合到染色体 DNA 上,随染色体 DNA 进行同步复制
(选修 3 P6寻根问底)DNA 连接酶和 DNA 聚合酶的作用相同吗
提示 不相同
DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接在一起,而 DNA 聚合酶是将单个的脱氧核苷酸连接到 DNA 片段上
2.(选修 3 P4寻根问底、P7思考与探究 T2)限制酶主要来自于原核生物,为什么它不剪切自身的 DNA
试推测其在原核生物中的作用
提示 限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别特定的碱基序列