第 34 讲 基因工程[考纲明细] 1.基因工程的诞生(Ⅰ) 2.基因工程的原理及技术(含 PCR 技术)(Ⅱ) 3.基因工程的应用(Ⅱ) 4.蛋白质工程(Ⅰ) 5.实验：DNA 的粗提取与鉴定考点 1 基因工程的操作工具1．基因工程概念基因工程的别名基因拼接技术或 DNA 重组技术 操作环境生物体外操作对象基因操作原理基因重组操作水平DNA 分子水平 基本过程剪切→拼接→导入→表达目的创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品优点克服远缘杂交不亲和障碍，定向改造生物的遗传性状2．限制酶(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化而来。(2)作用：识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列 ，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(3)形成末端类型3．DNA 连接酶(1)作用：将双链 DNA 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸间的磷酸二酯键。(2)种类种类E·coliDNA 连接酶T4DNA 连接酶来源大肠杆菌T4 噬菌体特点只“缝合”黏性末端黏性末端和平末端都可“缝合”(3)DNA 连接酶和限制酶的关系4．载体(1)条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切割位点；具有标记基因。(2)种类(3)作用：携带外源 DNA 片段进入受体细胞 。(4)特点：可在受体细胞中进行自我复制或整合到染色体 DNA 上，随染色体 DNA 进行同步复制。1.(选修 3 P6寻根问底)DNA 连接酶和 DNA 聚合酶的作用相同吗？试简要说明。提示 不相同。DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接在一起，而 DNA 聚合酶是将单个的脱氧核苷酸连接到 DNA 片段上。2．(选修 3 P4寻根问底、P7思考与探究 T2)限制酶主要来自于原核生物，为什么它不剪切自身的 DNA？试推测其在原核生物中的作用。提示 限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的碱基序列，并在特定的位点上进行切割；限制酶不切割原核生物自身 DNA 的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。原核生物容易受到自然界外源 DNA 的入侵，但是，生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制。限制酶就是原核生物的一种防御性工具，当外源 DNA 侵入时，原核生物会利用限制酶将外源 DNA 切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起切割外源 DNA、使之失效的作用，从而达到保护自身的目的。3．(选修 3 P7思考与探究 T3)天然的 DNA 分子是否可以直接用做基因工程载体？为什么？提示 不可以。具有能自我复制、有一个或多个...
