最新:PCR 实验室污染的应急处理方法(全文)PCR 检测因其高灵敏度、快速、操作方便等优势已经被广泛应用,不过正 是由于它灵敏度极高,极微量的污染源都有可能导致检测结果的假阳性, 因此所有的预防措施都会稍稍有所不同。「易查不易察」,污染来的悄无声息,我们该如何应对。那么,如何避开以及处理实验室污染,对 PCR 人来说是一门必修课。一、PCR 实验室污染分类1、样本间交叉污染主要是在采(取)样的过程中,由于取样工具之间的交叉造成污染;或者 在核酸提取的过程中,由于移液器、离心管等使用不当导致的污染。2、PCR 试剂污染主要是在 PCR 组分试剂加样过程中,由于移液器、容器、阴性对比及其 它试剂被核酸模板或阳性对比污染。3、PCR 扩增产物污染这是 PCR 反应中最主要最常见的污染问题。因为 PCR 产物拷贝量大, 远远高于 PCR 检测数个拷贝的极限,所以极微量的 PCR 产物污染,就 可形成假阳性。还有一种容易被忽视的污染,是能造成 PCR 产物污染形式的气溶胶污染, 而气溶胶造成的污染是一个值得特别重视的问题。4、克隆质粒污染在实验操作中会常常用到阳性参考品,这些参考品大多数是由某些克隆质粒制作而成的,质粒在单位容积内浓度高,不小心使用极易造成污染。二、实验室污染处理方法1. 物料准备(1)购买喷壶(能够喷出雾状水汽的即可);⑵ 购买市面上有效氯消毒片,根据要求配置不同浓度的消毒液,或者购买 成品次氯酸钠消毒液配制合适浓度消毒水;⑶ 购买核酸气溶胶污染清除剂(DNA AWAYO 原液 /MediClean⑧ 稀释 1 倍);⑷ 无纺布/无尘纸等。2. 应急处理方法⑴ 清理废液缸并且对废液缸用有效氯含量为 20mg/L 消毒水浸泡消除 核酸污染;⑵ 用有效氯含量为 20mg/L 消毒水对移液枪进行擦洗,关键部位为移 液枪前端易污染部位,清洁洁净后用洁净水再擦拭一遍;(3)将离心管架、扩增管架、扩增管架底板、吸嘴盒及其他相关物品用有效 氯含量为 5mg/L 的消毒水浸泡 2 小时后,用清水冲洗洁净晾干后使用; ⑷对污染区域内的设备如扩增仪、全自动提取仪等,使用核酸气溶胶污染 清除剂进行反复处理;对生物安全柜等含有空气过滤系统的设备,需更换 过滤网;⑸ 用有效氯含量为 5mg/L 的消毒液对整个实验室(地板、墙面、天花 板、门、窗户等地方)进行清洁,并且用用有效氯含量为 10mg/L 的消 毒水对实验室进行喷雾消毒(重点部位为操作区),有效降解空气中的气 溶胶与附着...