基因工程考试重点

第一章1. 基因工程：通过工具酶，在体外将目的基因、基因片段或其他 DNA 元件进行切割，与适当的载体进行连接和重组，导入相应的受体细胞，并使外源基因进行复制和表达，定向改造受体生物性状或获得表达产物。2. 一个克隆：从一个亲本细胞增殖而来的细胞群体。3. 1997 年转基因番茄上市，俗称“百日鲜”。4. DNA 的组成：五碳糖，即脱氧核糖；磷酸基团；4 种含氮碱基。5. RNA 聚合酶：核心酶和。因子。转录终止子：依赖 p 因子，不依赖 p 因子。6. 起始密码：AUG 终止密码：UAA,UAG ,UGA7. 亚克隆：初始克隆中的外源 DNA 片段往往较长，具有许多目的基因以外的 DNA 片段，在诸如表达、序列分析和突变等操作中不便进行，因此必须将目的基因所相应的小段 DNA 找出来，这个过程就叫亚克隆。8. 原核生物基因组成：启动区，SD 区，基因区，转录终止子和终止因子；真核生物基因组成：转录启动区，基因区，转录终止子。结构基因：转录启动区，核糖体辨认区，编码区，转录终止区。第二章1. 限制作用实际就是限制酶降解外源 DNA，维护宿主遗传稳定的保护机制。2. 甲基化是常见的修饰。宿主细胞通过甲基化作用达成辨认自身遗传物质和外来遗传物质的目的。3. 命名：依次取宿主属名第一字母、种名头两个字母、菌株号、序号（罗马字）。4 限制与修饰系统的比较II（所占比例最大）II酶分子内切酶与甲基化酶三亚基双功能酶二亚基双功能酶分子不在一起辨认位点 4-6bp,大多数为二分非对称5-7bp 非对称回文对称结构切割位点在辨认位点中或无特异性，至少在在辨认位点下游 24-26bp靠近辨认位点辨认位点外 1 0bp限制反映与分开的反映互斥同时竞争甲基化反映限制作用是否是是否需用 ATP5. 辨认序列（大都为回文对称序列）辨认的长度一般为 4-8 个碱基，6 个为常见。EcoR I G1AATTC Hind III A1AGCTTBamH I GIGA TCC6. 同裂酶：辨认相同序列的限制酶称为同裂酶，但它们的切割位点也许不同。同尾酶：许多不同的限制酶切割 DNA 产生的末端是相同的，且是对称的，即它们可产生相同的粘性末端，这些酶统称为同尾酶。7. 一个单位酶：是指在建议使用的缓冲液及温度下，在 20ul 反映液中反映 1h，使 lugDNA 完全消化所需的酶量。8. 位点偏爱:某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一个辨认序列表现出不同的切割效率，这种现象称作位点偏爱。9.常规缓冲液：稳定 PH 的缓冲剂、镁离...