实验动物肿瘤模型

实验动物肿瘤模型从肿瘤起源分，肿瘤动物模型的分类如下：从讨论目的来分，可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析：01 讨论肿瘤细胞增殖细胞准备：GeneA 敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为：空白对比组、阴性对比组、实验组。取 Balb/c 裸鼠，雄性，6 周龄，每组 10 只，适应一周后进行肿瘤细胞注射。XXX 细胞消化离心后制成单细胞悬液，计数后取适量的细胞用 PBS 悬浮，在 Balb/c 裸鼠侧腹部皮下接种。每只接种 2×106 个细胞，注射体积为 100μL。此后，每隔 5 天测量注射部位肿瘤的体积。30 天后裸鼠小鼠腹腔注射 80mg/kg 戊巴比妥钠，小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照（侧卧位，接种部位朝上），小鼠颈椎脱臼处死，取出肿瘤称重，将肿瘤置蓝色背景布上拍照，肿瘤一分为二，一份 4%多聚甲醛固定，待后续病理分析，一份-80℃冻存。02 讨论肿瘤细胞转移肿瘤转移的模型包括两大类：体外(浸润模型)和体内(转移模型)。体外(浸润模型)：了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。体内模型主要讨论肿瘤细胞的转移性即肿瘤细胞在远端组织形成病灶的能力。2.1.体外(浸润模型)例：浸润型脑胶质瘤动物模型的建立方法：取若干只 Balb/c 免疫缺陷裸鼠，将分离和鉴定并转染携带绿色荧光蛋白的脑胶质瘤干细胞立体定向法行小鼠颅内接种，每组 10 只。小鼠麻醉后头部正中切口，剥离骨膜后钻孔(坐标是冠状缝后 0.5cm，矢状缝右侧2.5cm)。取 2μL 胶质瘤干细胞以 1×104 cells/只小鼠的剂量，经微量注射器缓慢注射入鼠脑纹状体内(深度是 2.5～3mm)。在确定的时间点处死一部分动物进行荧光(立体荧光显微镜下)病理证实和比较，同时检查脑胶质瘤干细胞的体内生长特征以及干细胞标志物等。2.2.体内(转移模型)例：肩胛部皮下接种的方法建立裸鼠乳腺癌移植瘤模型，目的：观察壮骨镇痛胶囊对裸鼠乳腺癌移植瘤模型骨转移相关指标整联蛋白 αvβ3（ITG-αvβ3）及骨唾液酸蛋白（BSP）表达的影响。方法：取处于对数生长期的乳腺癌细胞 MDA-MB-231，用 0.25%胰蛋白酶消化制成单细胞悬液，收集细胞，细胞计数板法计数，调节细胞浓度为2×107 个/mL，按 0.2mL/只接种于裸鼠右前肢肩胛上区，接种部位可以见一皮丘，质软，2 天后，皮丘基本吸收，10 天后接种部位可触及米粒大结节，质硬，即乳腺癌移植瘤组织。检测壮骨镇痛胶囊对移植瘤组织中 IGT-αvβ3 和 BSP 表达的影响。例：原位移植建立人肾透明细胞腺癌裸鼠转移模型，观察肿...