实验 1 糖得呈色反应与还原糖得检验一、实验目得1、学习鉴定糖类及区分酮糖与醛糖得方法。2、了解鉴定还原糖得方法及其原理。二、实验原理糖经浓无机酸处理,脱水产生糠醛或糠醛衍生物。戊糖形成糠醛,己糖则形成羟甲基糠醛。这些糠醛与糖醛衍生物在浓无机酸作用下,能与酚类化合物缩合生成有色物质。与一元酚如 α 一萘酚作用,形成三芳香环甲基有色物质。与多元酚如间苯二酚作用,则形成氧杂蒽有色物质,反应式如下:通常使用得无机酸为硫酸。如用盐酸,则必须加热。常用得酚类为 α 一萘酚、甲基苯二酚、间苯二酚与间苯三酚等,有时也用芳香胺、胆酸、某些吲哚衍生物与一些嘧啶类化合物等。有人认为,用浓硫酸作为脱水剂时,形成有颜色得产物与酚核得磺化有关,见如下反应式;(一)糖得呈色反应 1.Molish 反应(α～萘酚反应) 本实验就是鉴定糖类最常用得颜色反应。糖在浓酸作用下形成得糠醛及其衍生物与α 一萘酚作用,形成红紫色复合物。在糖溶液与浓硫酸两液面间出现紫环,因此又称紫环反应。自由存在与结合存在得糖均呈阳性反应。此外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸、丙酮、甲酸、乳酸等皆呈颜色近似得阳性反应。因此,阴性反应证明没有糖类物质得存在;而阳性反应,则说明有糖存在得可能性,需要进一步通过其她糖得定性试验才能确定有糖得存在。 2.蒽酮反应 糖经浓酸水解,脱水生成得糠醛及其衍生物与蒽酮(10 一酮一 9,10 一二氢蒽)反应生成蓝一绿色复合物。 3、 Seliwanoff 反应(间苯二酚反应) 该反应就是鉴定酮糖得特别反应。在酸作用下,己酮糖脱水生成羟甲基糠醛。后者与间苯二酚结合生成鲜红色得化合物,反应迅速,仅需 20—30s。在同样条件下,醛糖形成羟甲基糠醛较慢。只有糖浓度较高时或需要较长时间得煮沸,才给出微弱得阳性反应。蔗糖被盐酸水解生成得果糖也能给出阳性反应。 4.Bial 反应(甲基间苯二酚反应) 戊糖与浓盐酸加热形成糠醛,在有 Fe3+存在下,它与甲基间苯二酚(地衣酚)缩合,形成深蓝色得沉淀物。此沉淀物溶于正丁醇。己糖也能发生反应,但产生灰绿色甚至棕色得沉淀物。(二)还原糖得鉴定含有自由醛基(一 CHO)或酮基(>C==O)得单糖与二糖为还原糖。在碱性溶液中,还原糖能将金属离子(铜、铋、汞、银等)还原,糖本身被氧化成酸类化合物,此性质常用于检验糖得还原性,并且常成为测定还原糖含量得各种方法得依据。1.Fehling 反应 费林试剂就是含有硫酸铜与酒石酸钾钠得氢氧化钠溶液。硫酸铜与碱溶液混合加热,则生成黑色得氧化铜沉淀...
