细菌分离培育方法及操作步骤无菌取血液或脏器、淋巴结划线接种于鲜血琼脂平板或血清琼脂平面培育基、普通肉汤培育基,37℃恒温培育 24 h,观察其生长特性。目前细菌分离培育得常用方法有平板划线分离法、加热分离法与实验动物分离法。平板划线接种法这就是目前临床上最常用得分离接种方法。它可以从被检病料中通过划线可使细菌分离、分散生长而形成单个菌落(有利于从含有多种细菌得标本中分离出目得菌),以便选择可疑菌落作纯培育加以鉴定。具体操作:1、右手持接种环,在酒精灯上火焰灭菌;图 1 病料采集 图 2 接种环灭菌2、待接种环冷却后,挑取被检料少许,左手持琼脂平板,以食指为支点,用拇指与无名指将平皿揭开一空隙。大约 20℃时,迅速地将接种环轻轻地涂布在培育基得边缘。3、在涂布处来回移动作曲线形划线接种。(注意:划线时,以腕力使接种环在琼脂平板表面划动,尽量不要划破培育基,划得线条要密,但不能重复旧线,以免培育物形成菌苔。)图 3 平板划线接种法4、划线完毕,合上平皿盖,将琼脂平板倒置,放入 37℃温箱内培育 18-24 小时。注意:分离培育用得平板培育基应表面干燥,可于临用前置37℃孵育箱内 30 分钟,这样表面即干燥有利于分离培育,又使培育基预温,对培育某些较娇弱得细菌有利。细菌药敏试验方法操作步骤药敏试验就是抗菌药使用以前必不可少得一个基本环节,一个正确得药敏结果能够科学得指导养殖户用药,减少抗菌素使用得盲目性,从而减少养殖户损失。在临床实际生产中具备重要意义。1、在“超净台”中,用经(酒精灯)火焰灭菌得接种环挑取适量细菌培育物,以划线方式将细菌涂布到平皿培育基上。具体方式; 用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌,以每点开始划线涂菌至平皿得 1/2。然后,找到第二点划线至平皿得 1/2,依次划线,直至细菌均匀密布于平皿。图 4 接种环划线2、以无菌操作将灭菌得不锈钢小管(外径为 4 毫米、孔径与孔距均为 3 毫米,管得两端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),放置在培育基上打孔,将孔中得培育基用针头挑出,并以火焰封底,使培育基能充分得与平皿融合(以防药液渗漏,影响结果)。3、添加药物:按不同药液加样,样品加至满而不溢为止。将平皿培育基置于 37℃温箱中培育 24 小时后,观察效果。图 5 添加药物药敏试验结果:图 6 药敏试验结果影响药敏结果得因素:1、培育基:应根据试验菌得营养需要进行配制。倾注平板时,厚度合适,约...