第 31 讲 微生物的利用知识内容考试要求知识内容考试要求1．大肠杆菌的培养和分离实验与探究能力2.分离以尿素为氮源的微生物实验与探究能力 细菌的培养与分离1．微生物：结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，如酵母、细菌、蓝细菌和病毒等。绝大多数微生物与传染病无关，90%以上的微生物对人类有利。2．培养基含义微生物生存的环境和营养物质成分① 水、无机盐、碳源和氮源，还需满足不同微生物生长对 pH、特殊营养物质以及氧气的要求②LB 培养基：蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、水、琼脂(固体培养基)LB培养基的作用① 蛋白胨、酵母提取物：为细菌生长提供碳源和氮源；② 氯化钠：维持一定的渗透压；③ 琼脂：凝固剂，不易分解，一般不作为营养物质。其在 96 ℃时融化成液体，冷却到 45 ℃以下即重新凝固种类① 按物理状态分，包括固体培养基、半固体培养基、液体培养基；② 按特殊用途分，包括基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基；③ 按培养不同微生物分，包括细菌培养基(pH 呈中性偏碱，添加有机物如蛋白胨、酵母提取物)、霉菌培养基(pH 呈中性偏酸，添加无机物或者添加蔗糖的豆芽汁)3.细菌的培养和分离细菌培养细菌分离划线分离法涂布分离法细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快。在培养细菌时，一般用接种环将已有细菌的培养物转移到新的培养基中。在液体培养基中，培养 8 h，每毫升培养基中有几亿个细菌。接种于固体培养基 10～20 h 后，一个细菌细胞会繁殖成许多个细菌细胞，聚集在一起，形成菌落用接种环在固体培养基表面连续划线的操作。由于划线过程中，接种环上的菌液逐渐减少，因此划线最后部分的细菌间距离加大。培养一段时间后，先将培养的菌液稀释，通常稀释 105～107倍。取 0.1 mL 稀释度不同的菌液，加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上，然后进行培养，得到相互分开的菌落。通常以每个培养皿有 20个以内的单菌落最为合适每一个细菌细胞产生一个菌落。再将每个菌落分别接种到试管斜面上，从而除去杂菌方法简单单菌落更易分开，但操作复杂些单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一4.灭菌操作项目灼烧灭菌高压蒸汽灭菌过滤灭菌适用材料或用具接种环、接种针或其他金属用具培养基、培养皿、试管等玻璃器具等尿素等加热会分解的物质续 表项目灼烧灭菌高压蒸汽灭菌过滤灭菌灭菌条件及时间在酒精灯火...
