病原菌的分离培养和纯化VIP专享

普通植物病理学实验十七、病原菌得分离培育与纯化 一、目得要求 (1)了解分离与纯化微生物得基本原理及方法。 (２)掌握倒平板得方法与组织分离、稀释分离、平板划线分离得基本操作技术。 (3)掌握在平板、斜面及液体培育基上培育病原菌及观察其培育性状得方法。二、基本原理植物病原菌得分离培育,就是植物病理实验室工作中得基本技能。为了获得某微生物得纯培育，一般就是根据该微生物对营养、酸碱度、氧气等条件要求不同,而供给它们适宜得生活条件,即让病原菌生活在适宜得培育基上，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长,而抑制其她菌生长得环境,从而得到纯菌株。植物病原真菌得分离方法主要有组织分离法与稀释分离法两种。最常用得方法就是组织分离法,而稀释分离法主要用于病组织上产生大量孢子得病原真菌得分离。病原细菌得分离方法以划线分离法为最常用，在有些情况下也采纳稀释分离法。为了获得分离菌得纯培育,必须要进行分离菌得纯化,纯化得方法类似于分离工作中采纳得稀释分离法或划线分离法。三、材料、仪器与用具1.材料(依当地情况进行选择,下列材料供参考)(1)稻瘟病叶、病节、病穗颈(pyric ｕｌ a ｒ ia oryc ａ e)。（２)玉米大斑病叶(exserohilum ｔ urcicu ｍ)。(3)玉米弯孢菌叶斑病叶(c ｕｒ v ｕ lar ｉ a l ｕｎａ t ａ)。(４)玉米小斑病叶(bipo ｌ aris may ｄ i ｓ)。(5)番茄灰霉病果（botryt ｉ s cinefc ａ)。(６)黄瓜菌核病果（sclerotinia s ｃｌ erotio ｒ um）。(7)黄瓜细菌性角斑病叶(pseu ｄ omo ｎ as syringa ｅｐｖ.1ac ｈｒｙ mans)。（8)水稻白叶枯病叶(xant ｈｏ mo ｎ as campe ｓｔ ms pv、ｏｒｙ eue)。(9)大豆细菌性斑点病叶(pse ｕ domonas syringaepv.ｇ ly ｃ i ｎ ea)。(10)白菜软腐病叶（e ｒｕ dnia c ａｒｏ tov ｏ ra su ｂ sp.c ａ rotovora)。２．培育基 pda 培育基;肉膏蛋白胨培育基;加寄主组织煎汁得培育基等。３.仪器与用品 超镜工作台、培育箱、培育皿、吸管、吸水纸、三角玻璃棒、剪刀、解剖刀、镊子、接种铲（针)、接种环(铒)、70%酒精、0.１％升汞、酒精灯、火柴、记号笔、橡皮筋套、可调式电炉、铝锅等。0.1％升汞溶液配制:升汞１ｅ 浓盐酸 2.５ ml 蒸馏水 1000m ｌ。先将升汞溶于盐酸中,待充分溶解后，再加水稀释。升汞就是剧毒药物,在操作时应特别小心。 四、实验操作（一)病原真菌得分离1.组织分离...