第四部分 浅尝现代生物技术 实验 12 乳酸脱氢酶同工酶的分离一、乳酸脱氢酶1．简称：____2．作用：在____________存在下，乳酸脱氢酶能使______产生________，具体反应式见下：________________________________________________________________________。答案：1.LDH 2．氧化型辅酶 NAD＋ 乳酸 丙酮酸 CH3－CHOH－COOH＋NAD＋LDH,CH3－CO－COOH＋NADH＋H＋(乳酸) (丙酮酸)二、同工酶1．概念：指能____________，但其________________的一组酶。2．实例：LDH 有____种同工酶。3．LDH 同工酶：结构特点：由____种亚基____和____以不同比例组成的________。具体类型：______、______、______、______和 M4。存在特点：在动物的________________中，LDH 各种同工酶的______不同。答案：1.催化同一化学反应 酶蛋白的分子组成不同2．53．2 L M 四聚体 H4 H3M H2M2 HM3 细胞分化及胚胎发育过程 比例三、乳酸脱氢酶同工酶的分离实验1．实验方法：____________法。2．染色：(1)方法：________法(2)染色原理：在 LDH 的作用下，NAD＋被还原为 NADH，NADH 将______和______传递给甲硫吩嗪(PMS)，还原的甲硫吩嗪再将______和______传递给氯化氮蓝四唑(NBT)，还原的氮蓝四唑呈____色，展现在电泳凝胶上。3．实验材料：牛的______，其余略。4．实验步骤：制备________↓加样↓________↓________答案：1.聚丙烯酰胺电泳2．(1)活性染色 (2)电子 H＋ 电子 H＋ 蓝3．血清4．电泳凝胶板 电泳 染色
