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高中生物《多聚酶链式反应扩增DNA片段》文字素材1 新人教版选修1

高中生物《多聚酶链式反应扩增DNA片段》文字素材1 新人教版选修1_第1页
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免疫-PCR免疫-PCR(immuno-PCR)是新近建立的一种灵敏、特异的抗原检测系统。它利用抗原-抗体反应的特异性和 PCR 扩增反应的极高灵敏性来检测抗原,尤其适用于极微量抗原的检测。免疫-PCR 试验的主要步骤有三个:① 抗原-抗体反应;② 与嵌合连接分子结合;③PCR 扩增嵌合连接分子中的 DNA(一般为质粒 DNA) 。该技术的关键环节是嵌合连接分子的制备。在免疫-PCR 中,嵌合连接分子起着桥梁作用,它有两个结合位点,一个与抗原抗体复合物中的抗体结合,一个与质粒 DNA 结合,其基本原理与 ELISA 和免疫酶染色相似,不同之处在于其中的标记物不是酶而是质粒 DNA,在操作反应中形成抗原抗体-连接分子-DNA 复合物,通过 PCR 扩增 DNA 来判断是否存在特异性抗原。免疫 PCR 优点为:① 特异性较强,因为它建立在抗原抗体特异性反应的基础上。② 敏感度高,PCR 具有惊人的扩增能力,免疫 PCR 比 ELISA 敏感度高 105 倍以上,可用于单个抗原的检测。③ 操作简便,PCR 扩增质粒 DNA 比扩增靶基因容易得多,一般实验室均能进行 。

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