多聚酶链式反应扩增 DNA 片段一、课题目标本课题通过尝试 PCR（DNA 多聚酶链式反应）技术的基本操作，使学生体验 PCR 这一常规的分子生物学实验方法，理解 PCR 的原理，讨论 PCR 的应用。二、课题重点与难点课题重点：PCR 的原理和 PCR 的基本操作。课题难点：PCR 的原理。三、课题背景分析课题背景首先介绍了 PCR 是一种在体外迅速扩增 DNA 片段的技术，然后说明这一技术在遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆等方面都有着广泛的应用，最后指出本课题的目标是了解 PCR 技术的基本原理，并尝试用 PCR 技术扩增 DNA 片段。教师在导入本课题的学习时，可以先让学生谈一谈对 PCR 的认识以及 PCR 的应用，以激发学生的学习兴趣，然后再说明本课题的目标。四、基础知识分析与教学建议（一）PCR 原理知识要点：1.细胞内参与 DNA 复制的各种组成成分与反应条件；2.DNA 的合成方向；3.Taq DNA 聚合酶的应用。教学建议：理解 PCR 的原理，需要首先了解细胞内参与 DNA 复制的各种组成成分与反应条件。教师在教学过程中，可以首先引导学生回忆必修 2《遗传与进化》中的有关 DNA复制的知识。在此基础上，学生需要进一步了解 DNA 双链的方向，芄磺諨 NA 的 3′端和5′端。此外，学生还需要了解 DNA 聚合酶的特性，如只能从 DNA 的 3′端开始延伸 DNA 链、而不能从头合成 DNA 等。Taq DNA 聚合酶的应用，解决了高温导致 DNA 聚合酶失活的问题，促成了 PCR 技术的自动化，是一个重要的知识点。教师可以结合专题 2 中课题 2“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”Taq 细菌的发现过程，帮助学生加深理解。（二）PCR 的反应过程知识要点：PCR 的基本步骤及每个步骤所发生的变化。教学建议：这部分内容的教学应以读图识图为主。教科书中图 5-9“PCR 反应过程图解”详细地描绘了参与 PCR 的各组成成分；每一轮反应的三个基本步骤──变性、复性和延伸；每一轮中每一个步骤所发生的变化，即每个步骤所具有的作用。教师在教学中可以请学生在读图的同时，结合教科书中的文字说明来加深理解。当学生遇到难以理解的地方时，教师要及时给予解答。五、实验案例PCR 扩增双歧杆菌编码 16SrRNA 的 DNA 片段1.双歧杆菌的培养。本实验用双歧杆菌作为实验材料，需要在实验前一天培养双歧杆菌。双歧杆菌的培养基配方如下。大豆蛋白胨 5.0 g 胰胨 5.0 g 酵母提取物 10 g葡萄糖 10 g...
