第 2 课时 基因工程的实施过程学习导航明目标、知重点难点 简述基因工程的一般过程
(重点) 理解基因工程每个步骤的原理、方法和过程
(重、难点) 阅读教材 P13～18完成基因工程的实施相关问题 基因工程涉及多种技术操作，主要包括获 取目的基因 ，构建基因表达载体，将目的基因导入受体细胞，以及目的基因的检测和鉴定等步骤
1．获取目的基因(1)通过基因文库获取目的基因
(2)通过 PCR 技术 扩增目的基因
(3)通过化学方法直接人工合成目的基因
2．构建基因表达载体(1)是实施基因工程的核 心步骤 ，其操作过程是将目的基因与质粒、λ 噬菌体或一些动植物病毒等在体外进行重组
(2)一个基因表达载体除了目的基因外，还应包括启动子、终止子和标记基因等
(3)启动子是位于目的基因上游的一段核苷酸序列，是 RNA 聚合酶 识别、结合的部位
(4)终止子是一段特殊的 DNA 片段，是载体上终止目的基因转录的核苷酸序列
3．导入目的基因(1)将基因表达载体导入受体细胞是实施基因工程的重要步骤
(2)将目的基因导入植物细胞的常用方法——农杆菌转化法
(3)将目的基因导入动物细胞的常用方法——显微注射法
(4)将目的基因导入微生物细胞的方法——转化法，用 Ca 2 ＋ 处理，使大肠杆菌等成为一种能够吸收周围环境中 DNA 分子的感受态细胞
4．检测和鉴定目的基因用 DNA 分子杂交法 进行 DNA 水平和 RNA 水平检测，采用抗原—抗体杂交从蛋白质水平检测，有时还需要从个体水平对其生物学特定性状进行检测
判一判(1)所有的目的基因都可从基因文库中直接获得
(×)(2)标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来
(√)(3)启动子位于基因的首端，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位
(√)(4)抗虫或抗病的接种实验属于分子水平的检测
(×) 连一连
