专题10生物技术实践考点31微生物的利用及在传统发酵技术中的应用[直击考纲]1
微生物的实验室培养
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
果胶酶在果汁生产中的作用
果酒及果醋的制作
胡萝卜素的提取
菊花的组织培养
血红蛋白的提取和分离
考点31微生物的利用及在传统发酵技术中的应用1.微生物的培养(1)无菌技术:主要包括消毒和灭菌
①消毒方法:常用煮沸消毒法、巴氏消毒法
②常用灭菌方法:灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具;干热灭菌——主要针对玻璃器皿等;高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等
(2)如图为倒平板操作过程,操作时要待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近进行
制备固体培养基最后要将平板倒置,其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染
(3)平板划线操作(4)稀释涂布平板法:先将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养
在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单个菌落
如图所示:2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)分离——选择培养基①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌
②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌
③培养基中缺乏氮源时,可以分离得到固氮微生物
④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果
⑤改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物
⑥土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用
(2)计数①筛选菌株:利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株
②计数方法:活菌计数法和显微镜直接计数法
前者为了增强实验的说服力和准确性,需设置重复组,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数
③过程:土壤取样→样品