第18讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用考点考试内容考试要求微生物的利用1
大肠杆菌的培养和分离实验与探究能力2
分离以尿素为氮源的微生物生物技术在食品加工中的应用1
果酒及果醋的制作实验与探究能力2
泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定微生物的利用1.大肠杆菌的培养和分离(1)大肠杆菌的性质与作用:大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,是基因工程技术中被广泛采用的工具
(2)大肠杆菌的扩大培养与分离:用LB液体培养基扩大培养,再在LB固体平面培养基上划线分离,培养后形成一个个单独的菌落
(3)细菌的培养和分离①划线分离法:方法简单
②涂布分离法:单菌落易分开,但操作复杂
(4)培养和分离步骤培养基灭菌→倒平板→培养液培养→划线分离→培养单菌落―→保存
2.分离以尿素为氮源的微生物(1)实验原理:利用尿素的细菌含有脲酶,通过降解尿素作为其生长的氮源
其反应式为(NH2)2C===O+H2O――→2NH3+CO2,生成的NH3使培养基的pH由原来的中性变为碱性,于是培养基中的酚红由红黄色变成红色
(2)实验步骤:制备培养基→制备细菌悬液→涂布分离法分离→培养和观察
(3)预测本实验的结果:LB全营养固体培养基上的菌落多而杂;尿素固体培养基上的菌落少而纯;一定时间内,菌落周围出现红色区域
用浓度为10-4和10-5土壤稀释液接种,更容易形成单菌落的是10-5土壤稀释液
3.构建微生物的培养与应用网络4.有关微生物实验的基本方法(1)制备培养基:计算→称量→融化→灭菌→倒平板
(2)无菌技术:主要指消毒和灭菌
(3)倒平板操作:待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板
(4)划线分离操作:划线分离是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
(5)涂布分离法:先将菌液进行一系列梯度稀释后,分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养