附件9“烟草cDNA文库构建及重要基因表达谱研究”项目评标情况一、招标要求1.项目意义建立烟草cDNA文库,获得大量的EST和全长cDNA序列是开展烟草功能基因研究的重要前提,是实施烟草基因组计划重大专项的基础性工作,将为烟草分子育种奠定基础
今年针对“烟草cDNA文库构建及重要基因表达谱研究”项目进行招标攻关,一是先期开展相关技术研究,为全面启动烟草基因组计划重大专项积累必要的技术、人才基础,二是通过项目招标,引导行业内外科研院所加大烟草遗传育种基础研究力度,推动烟草育种工程的顺利实施
目前美国、欧盟等先后开展了不同烟草品种的EST测序,并已获得了一定数量的烟草EST数据,但我国在烟草重要功能基因表达调控、代谢网络等分子水平的基础还相当薄弱
因此,充分利用我国的种质资源,建立不同种质在逆境诱导、不同发育时期以及不同组织器官的cDNA文库,分离克隆与烟草生长、发育、1抗逆、抗病、品质等有关基因的全长序列、调控因子以及特异启动子,研究其表达模式,进行基因表达产物分析、转基因功能验证及生理遗传学分析,对于确定基因功能,进而分析这些基因在烟草遗传改良中的利用价值和途径具有重要意义
2.研究内容(1)烟草cDNA文库的构建及测序
构建普通烟草不同组织、不同时期的全长cDNA文库;构建逆境诱导的特异组织的全长cDNA文库;构建特定烟草品种(品系)特定组织的全长cDNA文库;挑选克隆并进行测序
(2)基因挖掘与生物信息学分析
对测序数据进行拼接,对非重复全长cDNA序列进行功能注释和功能分类及代谢网络分析;建立烟草不同时期的基因表达谱以及全长cDNA序列的检索和比对数据库
(3)重要功能基因研究
利用生物信息学分析得到的相关基因的表达谱信息,鉴定重要的功能基因并开展关键基因的详细表达谱研究和功能分析
3.经济技术指标(1)完成覆盖烟草重要发育时期根、茎、叶、花等不同组织器官和特殊烟草种