1微生物的培养与利用一、与微生物有关的习题回顾1．苏州期末卷第30题：下图甲表示某细菌的质粒中相关限制酶的切割位点，图乙表示目的基因所在的DNA中相关限制酶的切割位点。请分析并回答下列问题：⑴用Smal限制酶处理图甲所示的质粒会得到________个DNA片段，用AluⅠ处理图乙所示的外源DNA会增加________个游离的磷酸基团。⑵为了避免目的基因和质粒在酶切后产生的片段发生自身环化或任意连接，以及便于筛选需要，在实际操作中，一般应选用_____________(填限制酶名称)同时酶切质粒和含目的基因的外源DNA。再用DNA连接酶处理。如果是用PCR技术扩增目的基因，设计引物是关键，但在扩增时退火温度一般为55℃一60℃，对于(A+T)％>50％，一般用55℃；(A+T)％≤50％时一般用60℃，原因是________________________________。⑶为了筛选获得含有重组质粒的大肠杆菌，实验人员首先将经转化处理过的大肠杆菌接种在含_____________(抗生素)的培养基中，然后用影印法将该培养基上的菌落按原来的方向印在含_______________(抗生素)培养基上，以筛选获得含重组质粒的细菌。在含四环素培养基中能生长繁殖，而在含氯霉素培养基中不能生长繁殖的是导人了_______________的大肠杆菌。⑷经检测：在上述导入了重组质粒的大肠杆菌菌株中，目的基因正常转录形成了mRNA，但其所控制合成的蛋白质却并不具有生物活性，最可能的原因是________________________。22．期末卷第25题改编下图表示运用影印培养法（使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法），检测重组质粒是否导入大肠杆菌。下列相关叙述中正确的是A.培养基A与培养基B的基本成份相同B.培养基A与B都为固体培养基C.培养基B中含有的特殊成分能抑制某种微生物生长D.该实验可能还要进一步分离纯化培养皿丙中的菌落4和63二、微生物的培养与利用实验工作单任务㈠：太阳光有杀菌作用吗？请利用所给材料定量地．．．加以探究。材料：一个有多个菌落的培养皿、接种工具---“印章”、空培养皿、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、天平、高压蒸汽灭菌锅、酒精灯等⑴设计实验步骤：①___________________________________②___________________________________③___________________________________④___________________________________⑵设计表格，并记录实验结果：⑶根据实验，记录相关问题操作中遇到的问题其它⑷你的实验结论是：_______________________________________________________________________拓展应用：防紫外线太阳伞、太阳镜、防晒霜的防紫外线效果如何？能通过类似的方法进行探究吗？如果能请写出设计思路。____________________________________________________________________________________________________________________________________________________实验评价⑴学生自评（你认为实验结果与预期是否相符）：____________（满分5分）；⑵教师评价：项目步骤设计表格设计问题记录实验结论拓展应用总分得分4任务㈡：分离出大肠杆菌。材料：含多种细菌（有大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、醋酸杆菌等多种细菌）的试管、接种环、灭过菌的平板培养基、酒精灯等大肠杆菌的菌落特征：边缘光滑，湿润，透明，粘稠的圆形。菌落如右图⑴设计实验步骤如下：①____________________________________________________________________②将划好线的培养皿置于37℃条件下培养24小时③从培养皿中的菌落中找到与描述及图形一致的菌落④沾取上述菌落中细菌再进行平板划线并培养观察⑵操作步骤①中的注意点有哪些？操作中的注意点目的保证无菌使“线”上的菌种越来越少⑶结果分析如何判断你是否得到纯化的大肠杆菌？若未得到请分析原因。____________________________________________________________________________________________________________________________________________________问题分析：用接种环划线时经常出现培养基表面被划破的现象，分析可能的原因并提出解决方案。__________________________________________________________________________________________________________________________________...
