1微生物的培养与利用一、与微生物有关的习题回顾1.苏州期末卷第30题:下图甲表示某细菌的质粒中相关限制酶的切割位点,图乙表示目的基因所在的DNA中相关限制酶的切割位点
请分析并回答下列问题:⑴用Smal限制酶处理图甲所示的质粒会得到________个DNA片段,用AluⅠ处理图乙所示的外源DNA会增加________个游离的磷酸基团
⑵为了避免目的基因和质粒在酶切后产生的片段发生自身环化或任意连接,以及便于筛选需要,在实际操作中,一般应选用_____________(填限制酶名称)同时酶切质粒和含目的基因的外源DNA
再用DNA连接酶处理
如果是用PCR技术扩增目的基因,设计引物是关键,但在扩增时退火温度一般为55℃一60℃,对于(A+T)%>50%,一般用55℃;(A+T)%≤50%时一般用60℃,原因是________________________________
⑶为了筛选获得含有重组质粒的大肠杆菌,实验人员首先将经转化处理过的大肠杆菌接种在含_____________(抗生素)的培养基中,然后用影印法将该培养基上的菌落按原来的方向印在含_______________(抗生素)培养基上,以筛选获得含重组质粒的细菌
在含四环素培养基中能生长繁殖,而在含氯霉素培养基中不能生长繁殖的是导人了_______________的大肠杆菌
⑷经检测:在上述导入了重组质粒的大肠杆菌菌株中,目的基因正常转录形成了mRNA,但其所控制合成的蛋白质却并不具有生物活性,最可能的原因是________________________
22.期末卷第25题改编下图表示运用影印培养法(使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法),检测重组质粒是否导入大肠杆菌
下列相关叙述中正确的是A
培养基A与培养基B的基本成份相同B
培养基A与B都为固体培养基C
培养基B中含有的特殊成分能抑